所含内容包括

1.1  实验常用手术器械  

1.2  动物实验的基本操作技术概述  

1.3  家兔的捉拿称重、麻醉

1.4  气管插管

1.5  颈总动脉插管

1.1  实验常用手术器械

（一）手术刀   

手术刀由刀片和刀柄两部分组成。

正确的执刀方法有四种，

执弓式是最常用的一种执刀方式，适用于切开腹部、颈部和股部的皮肤。

执笔式适用于切割短小的切口，用于轻柔而精细的操作。

握持式适用于切割范围较广、用力较大的操作。

反挑式适用于向上挑开的操作，可避免损伤深部组织。

（二）持针钳

持针钳是用来安装刀片或夹持缝合针的。前端较短粗，柄长，钳叶内有交叉齿纹，在缝合时不易滑脱。用持针钳夹持缝合针时应使用持针钳的尖端，并以夹在缝合针的中1/3和后1/3交界处为宜。

（三）血管钳

 也称止血钳，形状有直、弯两类，止血钳除用于止血外，还可以用来进行钝性分离。直血管钳多用于浅部组织止血和组织分离，弯多用于深部组织的止血和组织分离。精细的手术和细小的出血点，需要用蚊式止血钳。

执拿血管钳的姿势，用拇指和环指分别扣入钳柄的两环，中指放在环指的钳柄上，示指压在轴节处。

（四）手术剪

根据其结构特点有尖、钝，直、弯，长、短各型。据其用途分为组织剪和线剪。

直剪通常被用于浅部手术操作，弯剪被用于深部。

动物实验中，直剪常用来剪动物皮肤、皮下组织和肌肉；弯剪则常用来剪动物体毛。

另外，还有眼科剪，专用来剪开细软组织，如神经、血管、输尿管等，不可用来剪其它东西。

正确的执剪姿势与执钳相似。

（五）手术镊

手术镊分为有齿镊（也称外科镊）与无齿镊（也称解剖镊）两种。

有齿镊的前端有小钩齿，用于夹持较坚韧的组织如皮肤、筋膜、肌腱等，不易滑脱，对组织有一定的损伤作用。无齿镊的前端无钩齿，内有横纹，用于夹持细软组织，如血管、神经、粘膜等，对组织的损伤作用较轻微。

（六）组织钳

组织钳又称鼠齿钳、Allis钳，头端有一排细齿，主要用于夹持皮肤、筋膜或即将被切除的组织器官。

1.2  动物实验的基本操作技术概述

（一）静脉注射

 家兔一般采用耳缘静脉注射。耳缘静脉沿耳背后外缘行走，较表浅，用手拔去耳背外缘被毛，血管即显现出来。

（二）气管插管术

 在动物实验中，气管切开后插管可用于呼吸运动相关实验。在临床上，气管插管为呼吸道通畅、通气供氧、呼吸道吸引等提供最佳条件，是抢救呼吸功能障碍患者的重要措施。

（三）颈总动脉插管术

 颈总动脉位于气管两侧较深的位置，左右各有一根颈总动脉，通常与神经伴行。颈总动脉插管主要用于取血或测量颈总动脉血压。

1.3  家兔的捉拿称重、麻醉固定

（一）捉拿

 捉拿时用右手将家兔两耳轻轻地压于手掌内，同时抓住颈背部的皮肤，轻轻将家兔提起，用左手托住其臀部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在左手上。家兔一般不咬人，但其爪锐利，挣扎时极易抓伤人。特别注意不能只提家兔双耳或双后腿，也不能仅抓提腰背部皮毛，以避免造成耳、肾、腰椎的损伤或皮下出血。

（二）固定

 家兔耳缘静脉注射时，可将兔放置在实验台上，一人控制住其头部（头部不动，耳朵就不会大范围活动）及四肢活动，另一人进行注射。

 需要进行手术时，可将家兔麻醉后仰卧位放置在兔手术台上，四肢用布带绑缚拉直，打活结固定于手术台边的固定钩，头部用兔头固定夹固定于手术台柱上。

（三）麻醉

 实验动物的麻醉关键在于正确选择麻醉的方法和麻醉药，同时，要仔细地观察麻醉过程，判断麻醉效果。

 全身麻醉常用于较深或较广泛部位的手术，麻醉方法可分为吸入麻醉和注射麻醉两类。

 静脉注射多用于较大的动物，如家兔、猫、犬等，注射麻醉常用的药物为25%乌拉坦（氨基甲酸乙酯）溶液3.5ml/Kg。乌拉坦对呼吸的抑制作用小，麻醉作用较弱，持续时间较长，但乌拉坦对肝和骨髓有毒性，只适用于急性实验。

注射时先将家兔固定好，用左手示指和中指夹住耳缘静脉近心端，拇指和环指绷夹耳边缘远心端，使耳边缘平直，待静脉充分扩张后，右手持输液针头，从静脉远心端刺入血管内（第一次进针点要尽可能靠远心端，以便为以后的进针留有余地），顺着血管平行方向深入1cm，回抽注射器见血后，放松对耳根部位血管的压迫，左手拇指和示指移至针头刺入部位，固定针头与兔耳，缓慢注射药液。若回抽无血或注射阻力较大或出现局部肿胀，说明针头没有刺入静脉或针头发生堵塞，应拔出针头，重新检查后，在原注射点的近心端重新刺入。注射完毕后拔出针头，用干棉球压住针刺孔止血。若要留置针头，需要滴注生理盐水防止回血凝固而堵塞针头。

 动物的麻醉效果直接影响实验的进行和实验结果。如果麻醉过浅，动物会因疼痛而挣扎，甚至出现兴奋状态，呼吸心跳不规则，影响观察。麻醉过深，可使机体的反应性降低，更为严重的是抑制延髓的心血管活动中枢和呼吸中枢，导致动物死亡。因此，在麻醉过程中必须善于判断麻醉程度，观察麻醉效果。

判断麻醉程度的指标有：

(1) 呼吸：动物呼吸加快或不规则，说明麻醉过浅；若呼吸由不规则转变为规则且平稳，说明已达到麻醉深度；若动物呼吸变慢，且以腹式呼吸为主，说明麻醉过深，动物有生命危险。

(2)反射活动：主要观察角膜反射，若动物的角膜反射灵敏，说明麻醉过浅；若角膜反射迟钝，麻醉程度适宜；角膜反射消失，伴瞳孔散大，则麻醉过深。

(3)肌张力：动物肌张力亢进，一般说明麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。

(4)皮肤夹捏反应：麻醉过程中可随时用止血钳或有齿镊夹捏动物皮肤，若痛觉反应灵敏，则麻醉过浅；若反应消失，则麻醉程度合适。

总之，观察麻醉效果要仔细，上述四项指标要综合考虑，最佳麻醉深度的标志是：动物卧倒、四肢及腹部肌肉松弛、呼吸深慢而平稳、皮肤夹掐反射消失、角膜反射明显迟钝或消失。在静脉注射麻醉时还要边注入药物边观察。只有这样，才能获得理想的麻醉效果。

麻醉注意事项：

① 不同动物个体对麻醉药的耐受性是不同的。因此，在麻醉过程中，除参照上述一般药物用量标准外，还必须密切注意动物的状态，以决定麻醉药的最终用量。静脉注药时应坚持先快后慢（前2/3量快，后1/3量慢）的原则，总注射时间在1分钟左右，避免动物因注射速度过快、麻醉过深而死亡。

②实验过程中如麻醉过浅，动物出现挣扎，可临时补充麻醉药以维持适当的麻醉，但一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一。

③麻醉时必须保持动物气道的通畅，特别是避免固定家兔时压迫到气管，造成窒息，家兔因缺氧死亡。

1.4  气管插管

将家兔麻醉后仰卧固定在手术台上，颈部去毛后，用手术刀在颈部自甲状软骨下缘正中线向下作长约3cm～5cm的皮肤切口，用血管钳钝性分离筋膜和左、右胸骨舌骨肌，暴露气管。分离时，不可用力过大，以免损伤血管和气管。钝性分离后，用血管钳将气管与背后的软组织分开，在其下穿一条粗棉线备用。在暴露的气管中段第三或第四软骨环上切开气管管径的1/2，用剪刀向头端作一纵向呈倒“T”形的切口，将合适口径的气管插管由切口向胸部方向插入气管腔内，用棉线在软骨环之间进行结扎，并将棉线固定于“Y”形气管导管分叉处，以防气管导管脱落。

气管插管注意事项：

①颈部皮肤切开后，必须使用血管钳进行钝性分离，严禁使用手术刀、手术剪做锐性分离，以免损伤颈部大动、静脉，发生大出血。

②气管横切口必须用手术刀在软骨环上切开，不能在软骨环之间肌肉上切开，以免出血过多。

③家兔气管为双层，外层是软骨肌肉层，内层是气管内膜。横切口要求必须切开至气管管径1/2，以保证切开内膜层，否则气管插管时，插管会插入气管内外层之间，造成家兔窒息。

④气管内膜切开后，如果只有少量出血，最佳止血方案是迅速完成气管插管并用棉线结扎固定，结扎后出血会立即终止。如果出血量较大，未插管前气管内已有凝血块产生，则需先用眼科镊将凝血块取出，再迅速插管结扎，然后将家兔下肢抬高，成脚高头低位，促进气管内血液排出。

1.5  颈总动脉插管

通常选用家兔左侧颈总动脉进行插管操作（右手操作较为方便），用止血钳分离覆盖在气管上的胸骨舌骨肌和侧面斜行的胸锁乳突肌之间的结缔组织，用左手拇指及示指捏住气管左侧肌肉往外拉开，示指及中指从颈部下方往上顶起，可见颈总动脉与神经伴行，仔细找到搏动的颈总动脉后，分离出一段长度约2～3cm的颈总动脉，在其下穿两根结扎线，一根结扎颈总动脉远心端，另一根打活结备用。用动脉夹夹住近心端的血管，然后用左手拇指及中指拉住远心端结扎线头，示指从血管侧后轻扶血管，右手持锐利的眼科剪，使之与血管呈45度角，在紧靠远心端结扎线处向心一侧，剪开动脉壁管径的1/3（最好一次剪成），将导管以其尖端斜面向下与动脉平行地向心脏方向插入动脉内（插管时左手往后，右手往前相对用力），用备用结扎线扎紧导管并打结固定，防止导管滑脱，一切就绪后再打开动脉夹。

颈总动脉插管注意事项：

①寻找动脉的手法非常重要！手法归纳为四个字：分拉顶看。颈总动脉位于气管外侧深部紧贴气管，要先用止血钳把气管外侧肌肉分离开，然后再用手将气管外侧的皮肤及肌肉组织往外拉开，暴露视野。接着再用手指从颈部下方将气管外侧深部的组织往上顶起，看到并确认颈总动脉后才能进行分离。没看到颈总动脉之前，不能盲目分离，以免损伤动脉造成大出血。

②分离颈总动脉时，要尽量把动脉周围的结缔组织膜分离干净，以免影响后面的插管操作。

③结扎动脉远心端时，要确保第一个结扎紧后，再完全放松丝线打第二个结。远心端结扎不紧，是剪开动脉后出血的最常见原因。

④插管时注意手法的规范：左手适当牵拉远心端结扎线（不要用力过度，会使动脉管径变小，影响操作）示指放动脉附近固定动脉位置（防止切开后发生旋转，以致插管时找不到切口），右手持眼科剪在靠远心端结扎线处（如切口太靠近动脉夹，将没有插管的余地）做一1/3切口（切小了动脉插管插不进去，切多了插管时容易弄断动脉），切口做好后（血管内血液流出后，血管管径会变细，要看清切口的位置），左手保持不动，右手换动脉插管进行插管。

⑤动脉插管完成后，结扎之后必须再固定。否则开放动脉夹后，动脉压力很高，动脉插管会被冲出脱落，造成插管失败以及大出血。

尽管在之前的生理学实验视频中我们使用了外科打结法。但外科打结法是属于大学三年级外科学的教学内容，并非生理学实验的教学内容，亦不作为实验操作的考核要求。因为初学者如果打结的手法不对，会形成假结或滑结，容易滑脱，所以推荐用平时最熟悉的打结方法完成实验操作。

但需要强调的是，在同学们进行实验操作时，无论采取何种打结方法，都必须保证扎紧