在 PCR 过程中：

a. 一个 TaqMan® 拷贝数检测试剂盒、一个 TaqMan® 拷贝数参考试剂盒、TaqMan® 基因分型预混液和一个 gDNA 样品混合在单孔或单管中。

b. gDNA 模板已变性，并且每组检测试剂盒引物退火到特定目标序列。每支 TaqMan® 探针专门退火到正向和反向引物结合位点之间的互补序列。当每条寡核苷酸探针完整时，淬灭基团染料靠近报告基团染料会导致报告基团染料信号被淬灭。

c. 在每轮 PCR 过程中，AmpliTaq® Gold DNA 聚合酶同时对靶标和参考序列进行扩增。此酶具有 5′ 核酸酶活性，可裂解杂交到每个扩增子序列的探针。当寡核苷酸探针被 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶 5′ 核酸酶活性裂解时，淬灭基团与报告基团染料分离，可增加报告基团的荧光。通过监测每个报告基团染料的荧光在每个 PCR 循环期间的增加程度，可实时检测 PCR 产物的积聚。

此相对定量法用于测定 gDNA 样品中感兴趣靶点的相对拷贝数（归一化到参考序列的已知拷贝数）。

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