斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。利用转基因技术将绿色荧光蛋白基因（G）整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。图1和图2所示分别为实验所用的质粒上相关酶切位点以及含绿色荧光蛋白基因（G）的外源DNA片段上具有的相关酶切位点。小水作者

（1）将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上的实验过程中，首先要将G基因与质粒重组，此过程需要的两种工具酶是                         。

（2）经筛选获得的重组质粒需要经显微注射到斑马鱼的     细胞中加以培养、筛选。如果培养得到的胚胎能          ，说明G基因已经成功整合到染色体上并且该基因已经得以表达。

（3）用图1中的质粒和图2外源DNA构建重组质粒，不能使用        切割，原因是                  。如果要防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，则应选择下列方法     为好。

①只使用EcoR I处理                 ②使用BamH I和Sma I同时处理

③使用BamH I和Hind III          ④使用Sma I和Hind III同时处理

（4）现用转基因个体N和个体M进行如下杂交实验得到的子代胚胎表现型如图3所示，推测亲代M的基因型是     。子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括   （选填选项前的序号，可多选）。①DDGG    ②DDGg    ③DdGg    ④DdGG

（5）杂交后，出现红·绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是             ，导致染色体上的基因重组。（提示：哪一亲本在什么生理过程中发生什么行为）