非标定量技术(LFQ)

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非标定量技术(LFQ)

2024-06-26 06:55:51| 来源: 网络整理| 查看: 265

     采用稳定同位素标记定量的方法,能够精确的对蛋白表达水平进行定量分析。然而,标记定量的方法也存在某些不足之处:包括,额外的样品处理过程,昂贵的标记试剂,不完全标记导致样品复杂化,低丰度多肽难以检测,可标记样品数量有限等。作为替代,非标记定量技术(LFQ,label-free quantification)能够避免此类缺陷。LFQ定量通常可采用两种方式:(1)谱图计数法(Spectral counting),使用多肽被鉴定次数来代表对应多肽的相对含量,进而计算出对应蛋白的相对表达量;(2)母离子强度(precursor ion intensity),提取鉴定到的多肽在一级质谱(MS1)中的色谱峰面积代表其相对含量,然后计算出对应蛋白的相对表达量。和标记定量技术不同在于:标记定量样品预先混合并同时进行LC-MS/MS检测,而LFQ技术要求每个样品独立进行制备和LC-MS/MS检测,因此准确性和通量弱于标记定量技术。

图1. Label-free定量技术原理。

技术优势 ● LFQ定量技术克服了同位素标记定量技术的诸多限制,更加灵活,适用于各种样品;更高的灵敏度,定量更多的蛋白。 ● 特异性与灵敏度兼备:基于质谱的蛋白质组学精确到单个氨基酸位点,蛋白鉴定准确,灵敏度高,是profiling分析和PTM研究的强大工具。 ● 严格的质量控制:数据稳定、重现性好,定量动态范围广,多个样品平行处理,接近标记定量的定量准确性。 ● 专业的数据分析:标准的搜库流程,专业的统计和生信分析,出版级的图表展示,完整全面的分析报告。 样品要求

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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途



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