STR鉴定报告怎么看? |
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▲图2 STR基因分型结果 STR位点基因分型结果峰图 在报告中会给出受检细胞系的STR检测结果峰图(图3),该峰图是实际PCR扩增后检测到的片段长度和分型信息。位点信息与表1(图2)相同。 ▲图3 STR基因分型结果峰图 *STR: 短串联重复序列(short tandem repeats,STR)也称微卫星DNA(microsatellite DNA), 通常是基因组中由1~6个碱基单元组成的一段DNA重复序列,由于核心单位重复数目在个体间呈高度变异性并且数量丰富,构成了STR基因座的遗传多态性。 ▲图4 STR 短串联重复序列 * 纯合子:Homozygote,指同源染色体在同一基因位点上的两个等位基因相同。即显示单个峰。 * 杂合子:Heterozygote,指同源染色体在同一基因位点上的两个等位基因不相同。即显示2个峰。 ▲图5 STR位点峰图 人源正常组织细胞其STR图谱,一个基因位点仅出现一个或2个峰(更多信息请查阅短串联重复序列 (STR, short tandem repeats) )。 如发生细胞交叉污染现象,基因位点会出现多等位基因,即一个基因位点出现3或4个峰(图6)。当然,也不能排除可能为三倍体等多倍体突变现象。 ▲图6 多等位基因峰图 3 STR位点基因分型结果比对 根据鉴定得到的细胞STR位点信息在ATCC、DSMZ等数据库中进行比对, 进入ATCC STR数据库页面(https://www.atcc.org/en/STR_Database.aspx )输入检测细胞的9个STR位点信息,与ATCC数据库进行对比。 ▲图7 ATCC 数据库比对 输入信息后给出比对结果(图8) ▲图8 ATCC数据库比对结果 同样在DMSZ数据库进行数据比对,得到匹配结果。 ▲图9 DSMZ数据库比对结果 比对结果中"%Match"(ATCC, 图8)及 "EV" (DSMZ, 图9)列是受检细胞的9个STR位点基因分型数据与数据库中细胞的匹配度。 人源细胞STR鉴定结果判定标准: 受检细胞STR位点的基因分型数据与其对应的标准细胞系(其原始组织或衍生细胞系)STR基因分型数据进行比对: 1)若两者的匹配度≥80%,则判定受检细胞系为标准细胞系或为标准细胞系的衍生细胞系。 2)若两者的匹配度在56%-80%之间,建议结合细胞系形态、细胞系特异性标记物等辅助分析进行综合判断。 3)若两者的匹配度≤56%,则判定受检细胞样本与其对应的标准细胞系不相关。 参考文献: 1. American Type Culture Collection Standards Development Organization Workgroup,A.S.N., Cell line misidentification: the beginning of the end. Nat Rev Cancer, 2010. 10(6):p. 441-8. 2. Reid Y, Storts D, Riss T, Minor L. Authentication of Human Cell Lines by STR DNA Profiling Analysis. Assay Guidance Manual [Internet]. Bethesda (MD): Eli Lilly & Company and the National Center for Advancing Translational Sciences; 2004-.2013 May 1. 本文转自:逍鹏生物返回搜狐,查看更多 |
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