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这些我都知道啊，百度上就有！

接下去的这些缩写你肯定也见过，但你能分的清楚吗？

完整的抗体可以被胃蛋白酶切割，以去除抗体的Fc部分，产生F(ab’)2片段抗体，包括抗体的两条臂和铰链区。F(ab’)2片段经过β-巯基乙醇进一步切割后可去除F(ab’)2片段的一条臂，产生F(ab’)片段，包括抗体的一条臂和铰链区。注意，F(ab’)片段在结构上不同于F(ab)片段：F(ab)片段是由木瓜蛋白酶切割整个抗体产生的，不含有铰链区。

让我们来举个例子吧：

Goat F(ab’)2 Anti-Human IgG F(ab) Secondary Antibody。看到这个商品名称的时候是不是有那么一丢丢晕？有了上面的抗体结构知识，我们就可以分辨出来，首先这是一个山羊抗人IgG的二抗，具体来说这个山羊的二抗是F(ab’)2片段的形式，它特异性的靶向人的IgG F(ab)片段。

我现在分清楚了，之前买的二抗就是Goat anti-mouse IgG(H+L)，哪有你说的这么复杂呀？

一般的实验是够用了，但若是能了解各种抗体形式的特点的话将会帮助你更针对性的完善你的实验设计哟！

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二抗的形式：

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二抗的特异性：

看来看去好像还是抗H+L的完整二抗最为常用呀？而且还便宜！

这话也不错，再来举个例子好啦，说说F(ab)的二抗在双重标记实验中的妙用！

针对双重标记，一般都会选用不同种属来源的一抗，比如选择小鼠抗A因子的一抗，再选一个兔抗B因子的一抗，在后续的二抗选择中，选一个红色的抗小鼠二抗和一个绿色的抗兔二抗就能完美的区分两个因子啦！原理是很简单，但是在实际选购抗体的过程中往往并不是一切顺心的，如果样本的种属比较特殊，或者待检测的因子不那么常用的话，一抗的选择余地就不那么宽泛了，要轻松的挑选不同来源的两个一抗就变成了一个不可能的任务。

现在就教你一招，针对来自相同种属的一抗进行双重标记实验：

因为每个F(ab)二抗只包含一个抗原结合位点（单价），在随后的孵育过程中无法结合另一个一抗，可以用先后分步孵育的方法来实现相同种属来源一抗的双重检测！

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补充一点

针对多克隆抗体：因为多数多克隆抗体是IgG类别的免疫球蛋白，一般建议使用抗IgG的二抗。

针对单克隆抗体：二抗应该针对一抗的类别或亚类来选择。例如小鼠IgM一抗需要用抗小鼠IgM的二抗来检测。有时，会用到特定的抗体亚类（如人IgG1、IgG2）。在这种时候，对于单标实验可以使用通用的抗人IgG的二抗，大多数的类别特异性二抗能识别各个亚类。对于多重标记实验，则应当使用亚类特异性的二抗，以便区分不同的一抗。

好吧，今天说的好像确实有那么一点儿用，我现在要做实验去了！拜拜~

明明是翻抗体目录去了，装什么高冷呀！跑的这么快，我还有二抗的工艺没说呢！下次吧…

以上专业内容部分节选自bio-techne公司的《二抗技术手册》，想获得完整版敬请咨询您身边的国药试剂生命科学部销售代表。或邮件至：[email protected]索取手册电子版。返回搜狐，查看更多