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细胞冯库萨(VON KOSSA)染色试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 细胞冯库萨(VON KOSSA)染色试剂是一种旨在使用银还原技术,分析固定处理的细胞样本中钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良VON KOSSA方法、成功实验证明的。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。 技术背景 钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过嗜银染色,钙离子受到强光还原,由金属银沉积取代,呈现黑色。 产品内容 清理液(Reagent A) 250毫升 固着液(Reagent B) 10毫升 染色液(Reagent C) 10毫升 平衡液(Reagent D) 10毫升 产品说明书 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent C),避免光照;有效保证6月 用户自备 核固红复染试剂盒(40011):用于常规染色后复染 60瓦灯:用于还原钙离子 小型染色缸:用于细胞染色操作 光学显微镜:用于细胞染色后观察分析 实验步骤 操作一:细胞载玻片染色 样本固着处理 取出待测的细胞载玻片 小心加上200微升清理液(Reagent A)在载玻片上,铺满整个样品表面 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 小心加上200微升固着液(Reagent B),铺满整个样品表面 室温下,孵育10分钟 小心移去载玻片上的固着液(Reagent B) 小心加上200微升清理液(Reagent A),清洗样品表面 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 重复实验步骤7至8一次 二、样本染色处理 小心加上200微升染色液(Reagent C),铺满整个载玻片样品表面 室温下置于太阳光直射或60瓦灯直射孵育60分钟;或直至可见黑色 小心移去载玻片上的染色液(Reagent C) 室温下,小心将载玻片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 三、 样本复染处理 小心加上200微升平衡液(Reagent D)在载玻片上,铺满整个载玻片样品表面 室温下孵育5分钟(注意:平衡液(Reagent D)具有褪色调节作用) 小心移去载玻片上的平衡液(Reagent D) 室温下,小心将载玻片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟 小心移去载玻片上的清理液(Reagent A) 样本复染处理(核固红) 放上盖玻片或封片 即刻在一般光学显微镜下观察:钙沉积阳性细胞呈现黑色(如果复染:细胞质呈现粉红色,细胞核呈现红色) 操作二:24孔细胞培养板染色 一、样本固着处理 1.小心抽去24孔细胞培养板里的培养液 2.每孔加入400微升清理液(Reagent A),清洗生长中的细胞表面 3.小心抽去每孔里的清理液(Reagent A) 4.每孔加入400微升固定液(Reagent B),覆盖整个生长表面 5.在室温下孵育10分钟 6.小心抽去固定液(Reagent B) 7.每孔加入400微升清理液(Reagent A),清洗细胞表面 8.小心抽去清理液(Reagent A) 9.重复实验步骤7和8两次 二、样本染色处理 小心加上400微升染色液(Reagent C),覆盖整个生长表面 室温下置于太阳光直射或60瓦灯直射孵育60分钟;或直至可见黑色 小心抽去染色液(Reagent C) 室温下,小心加入400微升清理液(Reagent A) 室温下孵育2分钟 小心抽去清理液(Reagent A) 三、 样本复染处理 小心加上400微升平衡液(Reagent D),覆盖整个生长表面 室温下孵育5分钟 小心抽去平衡液(Reagent D) 小心加入400微升清理液(Reagent A) 室温下孵育2分钟 小心抽去清理液(Reagent A) 样本复染处理(核固红) 即刻在一般光学显微镜下观察:钙沉积阳性细胞呈现黑色(如果复染:细胞质呈现粉红色,细胞核呈现红色) 注意事项 本产品为50次(细胞载玻片)和25次(1个24孔板)操作 操作时,须带手套 所有操作在室温下进行 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面 样品染色避免过度,肉眼可见黑色即可终止染色 建议使用核固红复染试剂盒(40011),增强染色对比度 细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品 质量标准 本产品经鉴定性能稳定 本产品经鉴定显色清晰 来源:上海一基实业有限公司 联系电话:021-61119791 E-mail:[email protected] 互联网 喜欢作者 我要约稿 上一篇 | 下一篇 |
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