皮肤病检验技术：皮肤病料采集与压片制备

宠物皮肤病的病因多种多样，细菌、真菌、寄生虫，甚至内分泌因素都可能引起皮肤病。皮肤病常见的症状有脱毛、瘙痒、红疹、疱疹等，往往缺乏特异性，单纯依靠临床症状难以准确做出诊断，因此实验室诊断是减少误诊和漏诊的重要方法，同时对皮肤病的用药及护理也具有十分重要的指导意义。

 皮肤病料的采集方法主要有：

适用于有渗出的病灶，如丘疹、脓包。挤压病灶，当有结痂或是干性丘疹时取出结痂后再挤压，直接用载玻片粘取病料，风干，染色，镜检。注意尽量避免大量的血液出现。

用棉签采集所需要的病料，在载玻片上滚动使病料均匀的粘附于载玻片上，风干染色，镜检。主要用于耳道、阴道、脓包、口腔、有渗出物的病灶。

分为浅刮和深刮。剪去采样部位的长毛，将一滴甘油（或矿物油）滴在废旧的手术刀片或病灶之上，挤压皮肤持刀片垂直于皮肤顺毛流方向反复刮取。刮取的病料会粘附于甘油之上，收集病料直接压片镜检，当甘油量少时可适量添加。

疥螨常见于身体受压的部位，如跗关节、肘关节，也见于耳缘。大多数感染犬有极度瘙痒症状。

犬局灶性蠕形螨感染常见于面部（尤其是口、鼻周围）或爪部，而全身性感染则可能见于任何部位。蠕形螨经常深入毛囊内而被称为“毛囊虫”，因此刮片检查前应挤压皮肤。

一般情况下，皮肤样品的检验须同时进行透明化后镜检和染色后镜检，因此，病料涂片应至少准备2份。

采集好的皮肤病料，若不经任何处理而直接镜检，则视野中会有大量折光不均匀的斑驳皮屑团块，难以清晰地检出寄生虫。因此，皮肤病料应进行透明化处理后再进行镜检。

透明化处理方法主要有2种：KOH透明化和油化透明化。

①KOH透明化：在涂片上滴加1~2滴10%KOH，压上盖玻片后轻微加热。

②油化透明化：在涂片上滴加1滴矿物油（如石蜡油）或甘油，也可用显微镜镜头油或植物油，轻微加热，也可不加热。若加热，透明化程度更好，有时显微镜下课只见到螨虫的几丁质外壳，而基本见不到动物皮肤细胞等，非常便于观察。

注意，对于含水分很多的样品，油化透明化效果可能不如KOH法。

皮肤图片染色的方法与血涂片染色基本相同，但滴加蒸馏水后静置时间应缩短至30s以内。皮肤病患犬常出现皮脂腺分泌过多，导致涂片油腻，妨碍染色，此时可适当延长滴加染液及滴加蒸馏水后的静置时间。必要时，可先在涂片上滴加石油醚以脱脂，再进行染色。

皮肤被细菌、真菌感染时，局部常出现面积较大的脱毛、皮屑、渗出等。细菌多在毛发、角质层等处聚集，真菌多聚集在角质层及角质层下。所以，对于怀疑是细菌和真菌感染的病例，重点应放在采取皮屑，取样达到角质层即可，不必过分追求深度。

螨等是皮肤寄生虫感染的常见病因。疥螨寄生在皮下的隧道中，蠕形螨常在毛囊中或皮表，其所在区域常出现皮肤脱毛或红色小丘疹等标志。对此类病例，取样范围可局限在丘疹等标志附近，在深度上应保证达到真皮，稍出血即可，面积不宜过大。

皮肤取样时，用利刀的尖部小面积刮取容易取得较多皮屑，既可保证取样的深度， 又不至于造成过大过深的伤口，不引起大面积出血，取样部位的皮肤易于复原，且皮样中只含少量红细胞，对镜检的干扰小（红细胞难于透明化）。

如刀片较钝，往往非反复、用力刮皮而不能取得皮屑，常使采样局部呈现皮肤光亮、皮下出血，类似刮痧后的表现。此时若继续粗暴刮取，可将取样部位的表皮层全部刮脱，使皮肤出现较大、较深的破损，易导致瘢痕形成；且刮得的样品中含大量的红细胞，妨碍镜检。临床上时而见到此类皮损病例，可见瘢痕处色白，无毛发生长。畜主对此常有异议。