一种猫血型快速检测卡及其检测方法技术

【技术实现步骤摘要】 一种猫血型快速检测卡及其检测方法

[0001]本专利技术涉及猫血型检测，尤其涉及一种猫血型快速检测卡及其检测方法。

技术介绍

[0002]猫的血型有A型、B型和AB型三种类型，其中A型最多，B型次之，AB型最为罕见。与狗不同，猫具有针对“非自身”或外来红细胞的抗体，这些抗体可引起致命的免疫反应。B型猫体内有很强的附属抗A型抗体，当A型猫的血输给B型猫时，会引起强烈的免疫反应，输入的红细胞半衰期只有几分钟至几小时，进而引发输血急性或亚急性溶血反应，导致被输血的猫死亡。临床上只要1毫升A型猫血，就足以让B型猫产生严重的免疫反应。A型猫体内有较弱的附属抗B型抗体，当B型猫的血输给A型猫时，也会引起免疫反应，其反应较轻但也会缩短红细胞寿命，使其半衰期为2天。由于输血血型不合会导致致命的急性溶血反应，因此猫在输血前，确定其血型非常重要。另外，对于猫的繁育，确定血型也尤为重要，临床上猫新生儿溶血的现象时有发生，究其原因是母猫的奶中含有“非自身”血型的抗体，当B血型的母猫母乳喂养A型或AB型血的幼猫时，会使幼猫在两周内产生溶血，黄疸、褐色尿的症状甚至死亡。因此，猫血型的确认对繁育也至关重要。[0003]目前，使用猫血型快速检测试剂盒检测猫血型是使用最广泛的检测方法，市面上猫血型快速检测试剂盒的主流品牌为Rapid和这三种试剂盒都存在成本偏高，准确性偏低的问题。这是因为猫的AB血型系统不同于人的ABO血型系统，在人群中各血型分布相对平均，其检测血型的原料可以从样本中大量制备，而猫的A型、B型和AB型数量差距较大，B型血远远少于A型血，AB型血更是稀缺，因此从B型血和AB型血中获得相应的抗原较为困难。再次，猫和人的红细胞大小不同，市面上锁血的试剂一般都针对人红细胞开发，并不能有效的对猫的红细胞进行吸附定植。最后，临床上猫的贫血症状较为隐蔽，并且猫不具有与人沟通的能力，因此较难发现有自身血凝和血凝抑制障碍的猫，而现有的猫血型快速检测试剂盒的性能不足以准确辨别这些猫咪的血型。

技术实现思路

[0004]本专利技术为了克服现有技术下猫血型检测成本较高，检测结果准确性较差问题，提供一种猫血型快速检测卡，该检测卡结果读取直观快速，能检测普通猫血液样本、贫血样本和血凝异常样本的血型，且价格便宜。本专利技术还提供了一种使用猫血型快速检测卡的检测方法，该检测方法操作简单，检测准确度高。[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种猫血型快速检测卡，所述检测卡包括上壳以及与上壳固定连接的下壳；所述上壳设有A窗口、B窗口、C窗口以及缓冲液孔；所述下壳内侧卡扣A型血试纸条、B型血试纸条和质控C试纸条，A型血试纸条、B型血试纸条和质控C试纸条均包括依次叠加在片材底板上的样品垫I、反应垫、样品垫II和吸水垫，其中A型血试纸条、B型血试纸条和质控C试纸条的反应垫分别与A窗口、B窗口和C窗口对应，样品垫I一端与缓冲液孔对应。[0006]本专利技术利用不同蛋白对含有不同抗原的猫红细胞的特异性凝集效果检测猫的血型。待测样品从A窗口、B窗口、C窗口加入并通过A窗口、B窗口、C窗口观察血液凝集情况以得到结果，该检测卡能够准确检测猫的血型，并且该检测卡体积小巧美观，滴加简便，有效期长，检测结果准确度高。[0007]作为优选，所述A型血试剂条的反应垫包含抗猫A型血多克隆抗体，B型血试剂条的反应垫包含小麦凝集素，质控C试剂条的反应垫包含红细胞凝集素。[0008]抗猫A型血多克隆抗体可结合含有A型血抗原的红细胞；适量的小麦凝集素可会与B型猫抗原的红细胞产生明显凝集反应，而对A型猫红细胞则无凝集现象；红细胞凝集素可凝集所有血型的红细胞以达到验证本专利技术装置的检测结果的效果。[0009]作为优选，所述抗猫A型血多克隆抗体的制备方法为将猫A型血离心，去除上清，用0.005‑0.05M氯化铵溶液进行破碎，去除上清，再用生理盐水清洗，去除上清，将血浆沉淀稀释，用等比量佐剂配制抗原，乳化完全后于兔脊背处免疫，待兔血清效价达到1：100000以上，采集兔血，静置后离心，取上面的血清，纯化完成后即获得抗猫A型血多克隆抗体。[0010]作为优选，所述的猫A型血试纸条的反应垫经处理液I处理后干燥；所述处理液I的pH为7.5‑8.5，其组分包括水、5‑10g/L磷酸氢二钠、5‑20g/L BSA、10‑15g/L蔗糖、2‑20g/L海藻糖、0.01‑0.02％Proclin300、0.01‑1mg/mL抗猫A型血抗体。[0011]作为优选，所述的猫B型血试纸条的反应垫经处理液II处理后干燥；所述处理液II的pH为7.5‑8.5，其组分包括水、5‑10g/L磷酸氢二钠、5‑15g/L BSA、10‑15g/L蔗糖、2‑20g/L海藻糖、0.01‑0.02％Proclin300、0.01‑0.2mg/mL小麦凝集素。[0012]小麦凝集素的浓度过高时会使A型猫红细胞凝集，影响检测结果。[0013]作为优选，所述质控C试纸条的反应垫经处理液III处理后干燥；所述处理液III的pH为7.5‑8.5，其组分包括水、5‑10g/L磷酸氢二钠、5‑15g/L BSA、10‑15g/L蔗糖、2‑20g/L海藻糖、0.01‑0.02％Proclin300、0.01‑0.8mg/mL红细胞凝集素。[0014]作为优选，所述红细胞凝集素为接骨木凝集素或怀槐凝集素。[0015]作为优选，所述猫A型血试纸条、猫B型血试纸条和质控C试纸条的反应垫干燥过程为冷冻干燥10‑15h。[0016]作为更优选，所述冷冻干燥的温度为‑50±5℃。[0017]作为优选，所述处理液I、处理液II和处理液III还包括染料，染料为溴酚蓝、柠檬黄或苋菜红。[0018]染料可监测跑板是否正常进行，并且降低试纸生产过程中的混料风险。[0019]一种使用猫血型快速检测卡的猫血型检测方法，其特征是，包括如下步骤：(1)在A窗口、B窗口和C窗口中分别加入8‑12μL猫全血样本，静置3‑5min；(2)在缓冲液孔加入80‑100μL滴缓冲液，2‑5min后读取实验结果。[0020]A窗口、B窗口和C窗口加样后，静置3‑5min，使猫血样本与反应垫先行结合，再在缓冲液孔加缓冲液以冲洗反应垫，能凝集结合的红细胞就被本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】 1.一种猫血型快速检测卡，其特征是，所述检测卡包括上壳（1）以及与上壳固定连接的下壳（2）；所述上壳设有A窗口（11）、B窗口（12）、C窗口（13）以及缓冲液孔（14）；所述下壳内侧卡扣A型血试纸条（3）、B型血试纸条（4）和质控C试纸条（5），A型血试纸条、B型血试纸条和质控C试纸条均包括依次叠加在片材底板上的样品垫I、反应垫、样品垫II和吸水垫，其中A型血试纸条、B型血试纸条和质控C试纸条的反应垫分别与A窗口、B窗口和C窗口对应，样品垫I一端与缓冲液孔对应。2.根据权利要求1所述的一种猫血型快速检测卡，其特征是，所述A型血试剂条的反应垫包含抗猫A型血多克隆抗体，B型血试剂条的反应垫包含小麦凝集素，质控C试剂条的反应垫包含红细胞凝集素。3.根据权利要求2所述的一种猫血型快速检测卡，其特征是，所述的猫A型血试纸条的反应垫经处理液I处理后干燥；所述处理液I的pH为7.5 ‑ 8.5，其组分包括水、5 ‑ 10 g/L磷酸氢二钠、5 ‑ 20 g/L BSA、10 ‑ 15 g/L蔗糖、2 ‑ 20 g/L海藻糖、0.01 ‑ 0.02% Proclin300、0.01 ‑ 1 mg/mL抗猫A型血抗体。4.根据权利要求2所述的一种猫血型快速检测卡，其特征是，所述的猫B型血试纸条的反应垫经处理液II处理后干燥；所述处理液II 的pH为7.5 ‑ 8.5，其组分包括水、5 ‑ 10 g/L磷酸氢二钠、5 ‑ 15 g/L BSA、10 ‑ 15 g/L蔗糖、2 ‑ 20 g/L海藻糖、0.01 ‑ 0...

【专利技术属性】 技术研发人员：孙晓笛，高萌，陈金树，陆维克，路晓楠， 申请(专利权)人：杭州瑞测生物技术有限公司， 类型：发明 国别省市：