LDH

LDH-Glo 发光法细胞毒性检测 专场演出

▋ 细胞毒检测-细胞实验的常规操作

从日常的化合物筛选、药效评估、代谢研究到 ADCC，都离不开细胞毒性检测这个常规操作。

▋ 经典靶标 LDH

最早、最经典的细胞毒性靶标就是 LDH

▋ LDH 检测原理-偶联氧化还原反应

那么释放到细胞外的 LDH 是如何检测的呢?

▋ LDH 显色检测的不足之处

首先，显色法的 LDH 检测灵敏度较低，对微量细胞毒性检测稍显无力。

每次需吸取高达 50μl 也是个硬伤！

较窄的线性范围对于实验操作来说也会带来麻烦。

▋ 发光 LDH 检测给你全新的选择

Promega 新推出 LDH-Glo 发光法细胞毒性检测系统，采用了与显色法相似的反应原理，在最后一步氧化还原反应中，不再使用四唑盐底物，而是使用了萤光素底物衍生物。

由于发光法极高的灵敏度，显色法稍显无力的微量细胞检测也有了福音。

与显色法动辄 50μl 的「豪放」取样量相比，发光法每次只需吸取 2.5μl 培养物，剩余的细胞可继续培养到更长的时间点，因此一份样品可以支持多次取样，节省了样品也避免了样品误差。

由于每次取样量很少，不会影响剩余细胞的生长 (培养体系减少至 90% 仍能正常生长)，因此可很方便的兼容其他细胞分析手段，获得更多数据。

▋ 操作简便

秉承了 Promega 发光法试剂盒「能简单绝不复杂」的理念，LDH-Glo 试剂盒操作也是简单如一。将细胞与药物处理到规定时间点后取样，与 LDH 储存液混合稀释即可，稀释后的 LDH 样品既可以直接进入检测，也可以在-20℃ 或以下冻存后进行统一检测。

LDH 样品被 LDH 储存液稀释的比例需要根据实验的具体情况进行确定。参照下图图表，对于微量样本可以使用低稀释倍数以提高灵敏度，而如果样品中含有血清那么需要加大稀释倍数以对抗血清自带 LDH 的背景干扰。

Promega 推荐的稀释范围如下表，您可以以此为起点进行预实验确定最佳的稀释比例。

▋ 应用广泛，尤其适合 3D 细胞培养

3D 细胞微组织培养的健康分析一直缺乏有效的工具，LDH-Glo 毒性检测的高灵敏度特性正好为 3D 微组织培养的细胞毒性研究提供了优秀的解决方案。

LDH 检测也是 ADCC（抗体介导的细胞毒性作用）研究的重要毒性靶标，LDH-Glo 自然也能在此类应用中大显身手。

由于 LDH 的总数与细胞总数密切相关，因此可以使用 LDH-Glo 配合全细胞裂解来对细胞数目和增殖效果进行评估，这对于研究细胞增殖抑制作用的药物很有帮助。

▋ 三花聚顶-总有一款适合你

在加入 LDH-Glo 补齐发光法之后，Promega 的 LDH 检测试剂完全覆盖了显色、荧光和化学发光三大检测手段，您可以根据实验的要求或者硬件平台选择最合适的工具。

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图片来源：普洛麦格

编辑： 翟超男

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