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如何下载NCBI上的10X单细胞测序原始数据并用于Cell Ranger分析

2024-07-10 13:03| 来源: 网络整理| 查看: 265

1. 获取数据的SRR*

根据参考文献提供的GEO数据链接,直接在浏览器打开,或者NCBI官网检索GSE号,在数据网址的最下方点击SRA Run Selector链接跳转至新的页面,该页面包含原始fastq文件的SRR编号,和样本的一些基本信息。

2. 使用fastq-dump下载数据

以SRR9264343为例

fastq-dump --split-files --gzip SRR9264343

下载完成后有以下三个文件,Cell Ranger mkfastq处理之后,一般会产生3个fastq.gz文件,分别是I1文件,8bp的样本barcodes;R1文件16bp feature barcodes + 10 bp/12 bp UMI; R2文件转录组的reads文件。

从SRA Run Selector页面,单击单个样本的SRR*,可以跳转至以下页面并点击Data access,根据Original format处的信息,可以清晰地分辨下载后3个的文件分别对应的具体文件。

3. 下载文件修改命名

Cell Ranger 要求fastq文件的命名符合 bcl2fastq文件的命名规范,即以下模式:

[Sample Name]_S1_L00[Lane Number]_[Read Type]_001.fastq.gz

修改文件名,使其符合规范。或者直接将上面original format信息中Name列文件名修拷贝过去,修改后的文件名如下:

参考网址

https://kb.10xgenomics.com/hc/en-us/articles/115003802691-How-do-I-prepare-Sequence-Read-Archive-SRA-data-from-NCBI-for-Cell-Ranger

understand 10x scRNAseq and scATAC fastqs | DNA confesses Data speak



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