昆虫表达支持 – 入门

在Bac-N-Blue™系统中，转移载体和杆状病毒DNA的重组发生于昆虫细胞中。Bac-N-Blue™载体是一种线性AcMNPV衍生物，含有不完整的(3’) lacZ片段。相应的转移载体含有一个5’ lacZ片段。在同源重组的基础上，重组Bac-N-Blue™杆状病毒DNA将具有一个受PETL启动子控制的lacZ基因。因此，重组Bac-N-Blue™杆状病毒在空斑实验中会形成蓝色空斑，易于识别。在Bac-to-Bac表达系统中，转移载体与杆状病毒DNA间的重组或位点特异性转座发生于大肠杆菌（DH10Bac）中。在Bac-to-Bac表达系统中，含重组杆状病毒DNA的菌落筛选发生于含50 μg/mL卡那霉素（杆状病毒质粒）、7 μg/mL庆大霉素（pFastBac™）、10 μg/mL四环素（辅助性质粒）、100 μg/mL Bluo-gal和40 μg/mL IPTG的Luria琼脂板上。