【专题】骨骼检材DNA提取方案

手工解决方案

获得不含抑制剂的DNA是从骨骼检材中成功获得可用图谱的关键第一步。

方案1

美国Promega公司生产的 Bone DNA Extraction Kit, Custom（骨DNA 提取试剂盒）提供简单快速的骨骼样本预处理方法，

以方便用户在后续使用 DNA IQ™ 试剂纯化DNA，获得不含抑制剂的DNA。 （兼容手动或自动化Maxwell® DNA IQ™ 提取系统）

该DNA可以直接用于STR系统扩增。

产品特点：

★ 使用脱钙液 (Demineralization Buffer, Custom) 快速预处理骨粉；

★ 试剂盒提供预处理骨粉的所需试剂，包括蛋白酶K、还原剂等成分；

★ 兼容手动核酸提取方法及自动化Maxwell® DNA IQ™ 提取系统；

★ 获得去除抑制剂的DNA，并与下游扩增反应相容。

操作步骤

应用举例

样品: 1870-1880年代的股骨（大概相当于清朝同治时期的）

方案涉及主要产品：

预处理：Bone DNA Extraction Kit, Custom （品牌：Promega）；

纯化： DNA IQ™磁珠 （品牌：Promega）；

STR试剂盒：PowerPlex® Fusion System （品牌：Promega）。

自动化解决方案

利用自动化仪器——如上文提到的Maxwell® DNA IQ™ 提取系统，

或者 骨骼专用磁珠法DNA提取试剂盒，配合大体系疑难检材DNA提取仪（或KingFisher系统），

可以大大减少手工步骤，提高工作效率，同时减少因手工繁琐操作带来的污染问题，增加批次间稳定性。

方案2

方案涉及主要产品：

① 骨骼专用磁珠法DNA提取试剂盒--大体系疑难检材DNA提取仪专用（品牌：博坤生物）；

② 大体系疑难检材DNA提取仪（品牌： 博坤生物）；

（优点：不需手工浓缩，节省时间，工作效率更高）

③ PowerPlex21/VersaPlex 27PY STR试剂盒（品牌：Promega） 。

方案3

方案涉及主要产品：

① 骨骼专用磁珠法DNA提取试剂盒--KingFisher专用（品牌： 博坤生物）；

② KingFisher磁珠提取纯化系统（品牌： Thermo）；

③ PowerPlex21/VersaPlex 27PY STR试剂盒（品牌：Promega）。

应用案例

一

55年白骨化遗骸DNA检验应用

2016年10月23日，3名捡石头爱好者在花土沟镇境内大浪滩干盐湖发现人体白骨遗骸。青海省海西蒙古族藏族自治州茫崖行委公安局立即前往县城进行勘验。

经勘验，死者男性，完全白骨化。办案民警现场采取有价值的遗物后，对遗骸进行就地掩埋。经茫崖行委公安局对遗物多次分析研究，推断遗骸的死亡时间可能为1961年4月之后。

茫崖行委公安局通过各种途径搜索失踪人员信息，于11月29日，查到遗骸可能是辖区龙背乡失踪人员李中华。

为了进一步确认遗骸是否是李中华，青海、四川两地公安机关同步开展了DNA检验的相关准备工作，由青海省公安机关负责遗骸检验比对工作。最终，通过DNA鉴定，确认死者为李中华。

在本案件中，青海省公安厅采用的DNA鉴定试剂盒为美国Promega公司的PowerPlex 21 System和PowerPlex Y23 System。返回搜狐，查看更多