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手把手教你使用Imagepro

2024-07-16 00:17| 来源: 网络整理| 查看: 265

手把手教你使用Imagepro-Plus(五)——校正标尺 转载请注明来自丁香园 发布日期:2006-08-03 10:10 文章来源:丁香园 分享到: 收藏夹 新浪微博 腾讯微博 开心网 豆瓣社区 人人网 关键词: Imagepro-Plus IPP 图象分析 标尺 经验   点击次数:

在你打算学学标尺的操作并自己动手在自己电脑上玩玩标尺之前,要确认自己是要动真格地学会怎样设置这些东东。因为一旦标尺设置错误了,以后所有的几何测量数值都会出错的。而且不会因为你关闭程序或关闭电脑就能Reset了。如果你因为在这里学着定标尺而搞乱了你的IPP程序,可别埋怨我。 在前面的帖子中我一直没提及标尺,因此在提到测量面积直径等几何尺寸时都用象素作为单位。如果你需要测量微观物体的准确几何尺寸,那就得进行标定操作后才行。 还有一个需要标定的是光密度,这可就比几何标尺困难多了。对光密度进行标定我觉得麻烦而且不准确,在实际应用中我们一般都只测量相对的光密度对比,因此对光密度进行标定实在是吃力不讨好的事。所以关于光密度标定的部分我也实在懒得费力去写了。(修订:这段话看来是大错特错了,光密度较正是必须要作的,否则在进行灰度分析时肯定会出错,我在后面重新写了一个相关的帖子)不过本论坛里曾有人讨论过相关的内容。 标定标尺还需要有个物质准备,就是得有一个叫“微标尺”的小玻璃片。上面刻有准确的刻度,在1MM的长度上刻着100个分度刻度,这样这个小尺的每一格就是0.01MM。得在专业的显微镜生产商那才能买到,或者在买显微镜时把这个当作附件给买下来。如果没有这玩艺怎么办?还真有点难办。照理说如果有一个能放在载片上的尺寸已知的小东西也是可以的,这个东西首先得足够小,其次得准确知道它的尺寸。我现在能够想到的东西就是血球计数板。它的尺寸就是1平方毫米,分了几个大格和小格,线条精度虽然比不上微标尺,但误差也不会太大。可以凑合着用。上面说的是使用显微镜照片时用的标尺。如果你处理的是大个物体的照片,那就在物体边上放个米尺就行了。在拍摄物体的同时也把米尺的图象拍下来。 使用标尺来标定几何尺寸的方案是这样的:先用显微镜拍摄下微尺的图象,再用显微镜拍摄下样品显微图象,最后用微尺的图象来“量”样品图象的几何尺寸。在IPP中,程序先记住1MM相当于多少象素,然后测量样品图象的几何尺寸时只要先算出象素值,一换算就得了。 最重要的一点就是,现在的数码相机都有无级变焦,可以任意放大缩小画面。因此要特别注意,在拍摄微尺图象与拍摄样品图象时,绝对不能调节相机的变焦(ZOOM)。 显微镜一般都有4倍、10倍、40倍、100倍甚至更多物镜。可以分别用这些物镜拍摄下不同的微标尺图象,在处理不同物镜下拍摄的照片时使用各自对应的标尺。 具体的操作步骤如下:使用标尺的第一步就是拍摄微标尺的照片。拍一张是不行的。如果你的显微镜有4个物镜分别是4X、10X、40X、100X,那么就要分别拍摄下这四个镜头下的标尺图象。如果你的像机是非变焦镜头,还不错。不用管变焦的事。我的相机有五级变焦,其中光学变焦三级,数字变焦两级。而三级光学变焦中,两个短焦距变焦拍摄的图象亮度不均匀,不能用。数字变焦不予考虑。因为我固定使用一个焦距。否则每个变焦都要拍摄标尺照片。数码相机拍摄画面还有不同象素。分别是低、中、高三个档次。三种象素画面大小是不同的,因此也要分别拍摄它们的标尺图片。4个镜头,五种变焦,三种象素。共需拍摄4*5*3=60张不同的标尺图片。我偷懒,只拍摄4种镜头下各自的标尺照片,相机变焦与象素选择都只用一种。如果你的相机是无级连续变焦的,可得小心,得固定一个变焦值。图中分别是100X、40X、10X物镜下的微标尺照片。

设置标尺的菜单命令在measure --- carlibration -- spatial,弹出标尺标定的菜单来。

1.点击菜单中的new按纽。新建一个标尺,然后再最上面Name项下的spatial cal 0处点一下,改成40X-lowR。这是新建标尺的名称。虽然名称是可以随便取的,但最好能反映拍摄条件,40X表示物镜为40X,lowR表示数码相机采用最低象素画面格式。别用中文字符。2.在UNIT项下填入um。这是标尺单位,显微镜图片用微米来计量长度单位最合适。当然可以用别的,比如KM作单位,图片上一个小尺的长度就是几千万分之一公里。3.unit下面有一个convert when change unit选项,给勾上。

4.点pixels/unit框里的image按纽,就立即弹出scaling对话框,同时在标尺图片左上角显出一个标尺,将鼠标移到这个标尺的横杠上,点一下左键,光标就立即变成了小手,就用这个小手把光标拖下来,再将光标分别移到移到横杠的左右两端,用左键拖这两个端点到图片两边的标尺该线处。在这一步操作中,两个端点位置必须准确。一个方法是点scaling中的放大镜按纽调出放大窗口,可以看到鼠标所在处的放大图形。另一个方法是把标尺的两端放在短刻线的线头处,这样选点更准确。从下图的两个放大镜图象中可看出,端点在刻线中间时上下位置是没法选准的。而在刻线头处,上下左右都有参照,可以准确选中位置。在选端点位置时要尽量向两边拉,拉得越远,误差越小。5.左右端点都找好位置后,数一下两个端点之间有多少间隔,这个微尺每格10um,两端点间为二十小格,长度为200um,所以要在scaling里填上200。6.点OK关闭scaling窗口,回到spatial carlibration窗口。

大功告成了。点close关闭窗口结束。如果你觉得这个标尺作得不对,得重作,可以重新打开窗口,在Name中选出这个标尺,点image重新找端点。如果觉得不保险,就干脆点delete。关闭窗口,再打开它,刚才那个标尺就没有了,可以重新新建标尺。重复上面的步骤,把10X与100X镜下的标尺也给标定一下。窗口下面的几个选项都不要动它,保留默认值。那些是较正图象变形用的。谁敢说你用的显微镜或照相机有图像变形,厂家会跟你急眼的。至少我现在用的olympus显微镜图象没有一点看得出来的变形。

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编辑: bluelove 作者:hbchendl

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