【干货】手把手教你快速做出高质量的标准曲线

上图是我们得到的一个标准曲线的案例，横坐标是模板浓度的lg值，纵坐标是Ct值，公式y=-3.2825x+31.906代表两个变量之间的线性关系，也就是所测反应体系及引物的标准曲线。我们主要通过以下三个要素来评判标准曲线的质量高低。

1. R2：称为决定系数，要求大于0.98，值越高，代表标准曲线的线性化程度越好。

2. 扩增效率En: 要求扩增效率在90%-110%范围内，后续定量结果才更准确，扩增效率En=10-1/斜率  - 1，由公式推算出满足条件的斜率范围是-3.58至-3.1之间。

3. 线性范围：指的是Ct值和模板浓度的lg值之间呈线性关系时模板浓度范围，过低的模板浓度（试剂灵敏度不高）或者过高的模板浓度（含有抑制剂影响）可能不呈线性关系，如果样本浓度超过线性范围，定量不准确。因此，线性范围越宽广，能够准确测量样本浓度的范围也越宽广。