一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法与流程

1.一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取哈蟆油/林蛙油冻干粉置于容器内，加入氢氧化钾乙醇溶液回流提取30min后冷却，调节ph后采用60～90℃的石油醚振摇提取多次后合并石油醚液，室温挥发干燥，残渣加无水乙醇溶解，得到供试品溶液；

(2)取对照品不饱和脂肪酸制成不同浓度的对照品溶液；

(3)采用高效液相色谱法测定不饱和脂肪酸含量。

2.根据权利要求1所述的一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，所述步骤(1)中的哈蟆油/林蛙油冻干粉进行精细研磨。

3.根据权利要求1所述的一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，所述步骤(1)中的氢氧化钾乙醇溶液的浓度为0.5mol/l。

4.根据权利要求1所述的一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，所述步骤(1)中采用1mol/l盐酸溶液调节至ph为4.8-5.2。

5.根据权利要求1所述的一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中的不饱和脂肪酸为α-亚麻酸、亚油酸和油酸。

6.根据权利要求1所述的一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中采用0.1％的磷酸乙腈制成每1ml分别含45μg、120μg、150μg的不饱和脂肪酸对照品溶液。

7.根据权利要求1所述的一种哈蟆油/林蛙油冻干粉中不饱和脂肪酸含量的测定方法，其特征在于，所述步骤(3)中色谱条件为：

ods色谱柱；

以体积比80:20的乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相，流速1ml/min，柱温30℃；

检测波长为203nm；

进样量为10μl。

技术研发人员：张凤春;张殿铎受保护的技术使用者：黑龙江省四宝生物科技股份有限公司技术研发日：2020.06.23技术公布日：2020.10.02