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qPCR 曲线一团糟,可能一开始你就错了

2024-01-08 06:51| 来源: 网络整理| 查看: 265

阈值:是荧光信号相对于基线有显著增强的点,大多数仪器会根据基线平均信号,自动计算荧光信号的阈值水平,并设置一个比平均值高 10 倍的阈值。手动设置是置于指数扩增期,刚好可以清楚地看到荧光信号明显增强。每次改变阈值时,要查看标准曲线的斜率和 R 的平方有没有改善。

Cq 值:qPCR 扩增过程中,扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数,与起始浓度的对数成线性关系。分析定量时一般取 Cq:15~35,太大或者太小都会导致定量的不准确。

图 3:扩增曲线

熔解曲线:判断扩增的特异性,理想的熔解曲线具有锐利的单峰,证明 qPCR 实验中只可以检测到目的基因,引物特异性扩增靶序列,而没有扩增其他基因序列。

图 4:熔解曲线

GenStar qPCR 试剂特点

易检:荧光强度高,易检测。

更高:热启动 DNA 聚合酶,扩增效率更高,特异性更强。

更适:灵敏度更高,适合低拷贝基因。

更稳:重复性好,跨度均一产品性能稳定。

更低:使用方便,性价比高,实验成本更低。

GenStar qPCR 试剂试用反馈结果展示

今天为大家精心挑选了部分有代表性的结果,我们一起来看看吧!

1. 细胞 cDNA

2. 酵母 cDNA

3. 鼠单核细胞株 cDNA

4. 质粒 DNA

5. 细胞

看完以上结果展示,有没有心动呢,快来点击下方链接进入商铺了解详情吧!

内容审核:潘成

项目审核:钟可可

题图来源:图虫创意

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