巴沙鱼低眼巨鲶胚胎和仔稚鱼发育观察及其生长模型的确定

倪未1，2，陈海港1，刘晓莉1，于凌云1，李伟1，洪孝友1，刘毅辉1*，朱新平1，2*

(1.中国水产科学研究院珠江水产研究所 农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室，广东 广州 510380；2.上海海洋大学 水产与生命学院，上海 201306)

摘要：为研究巴沙鱼低眼巨鲶(Pangasianodon hypophthalmus)(亲鱼体质量为4.0～8.0 kg)胚胎发育和仔稚鱼发育特点，采用干法授精获得受精卵，观察其胚胎发育和仔稚鱼发育时序特征，并在生化培养箱(SPM-50)进行了不同盐度、温度对其胚胎发育的影响试验。结果表明：低眼巨鲶卵为黏性卵、透明，卵径为(1.60±0.23)mm；在水温为(30±0.5)℃ 时，其胚胎历经受精卵期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期和孵出期7个阶段(共23个发育时期)，22 h开始孵出仔鱼，28 h后全部孵出，初孵仔鱼全长为(4.38±0.23)mm；在不同温度和盐度下的孵化试验显示，最佳孵化水温为27～30 ℃，在此温度下的孵化率最高(49.35%～44.33%)，最适盐度为0，在此盐度下的孵化率最高(54.33%)，随着盐度的升高，孵化率逐渐降低；在水温为(30±0.5)℃ 条件下，初孵仔鱼的生长发育历经前期仔鱼(0～2 d)、后期仔鱼(3～16 d)、稚鱼期(17～29 d)和幼鱼期(30 d)；初孵仔鱼出膜后第3天卵黄囊完全消失。研究表明，低眼巨鲶孵化期短，最佳孵化温度为 27～30 ℃，最适盐度为0，是典型的热水性淡水鱼类；仔鱼前期生长较慢，20 d后开始增速，属于快速生长的鱼类。

关键词：低眼巨鲶；胚胎发育；仔稚鱼；温度；生长

低眼巨鲶(Pangasianodon hypophthalmus)隶属于鲇形目(Siluriformes)鱼芒鲶科(Pangasiidae)鱼芒鲶属(Pangasianodon)，俗称巴沙鱼(英文名Basa)，是东南亚重要的水产养殖品种[1]。其自然分布在东南亚湄公河流域，常见于湄公河下游，成鱼主要生活在湄公河中游。巴沙鱼原指博氏巨鲶(Pangasius bocourti Sauvage)，在2000年以后，外形相似并与博氏巨鲶同属的低眼巨鲶人工繁殖技术获得突破[2]，由于其在生长速度、耐低氧性、抗逆性、抗病力、单位面积产量和亲本怀卵量等方面具有优势，现逐渐取代博氏巨鲶成为越南主要养殖和出口的水产品种。越南政府为了巴沙鱼出口品牌的延续性，从2010年12月31日起出台政策，规定可把低眼巨鲶产品标示为“巴沙鱼”。至此，巴沙鱼除了博氏巨鲶外还包括低眼巨鲶，目前，中国养殖的巴沙鱼绝大多数为低眼巨鲶。

低眼巨鲶生长性能优越，产量约为450 t/hm2，是一种低投入、高动物蛋白产出的优秀养殖品种。越南是低眼巨鲶第一大养殖和出口国，年产超过125万t，2017年其产量占全球低眼巨鲶总产量的50%以上，低眼巨鲶主要销往美国、中国和欧盟，其中40%以上是在美国和中国市场消费。自2017年起，中国每年低眼巨鲶进口量超过30万t，中国市场以4.2亿美元的年进口量成为低眼巨鲶全球第一大消费市场，已超越美国成为越南最重要的低眼巨鲶市场。在市场引导下，中国一些企业通过引种，在海南、广东和广西开展了小规模的苗种生产和成鱼养殖。目前，中国低眼巨鲶养殖尚处于起步阶段，对低眼巨鲶的生物学特性还不是很熟悉，因此，有必要研究低眼巨鲶胚胎发育和仔稚鱼的生长规律，以推动低眼巨鲶苗种生产乃至养殖产业在中国的发展。

试验用低眼巨鲶亲鱼取自广东省佛山三水白金水产种业有限公司，试验地点在珠江水产研究所肇庆高要科研基地。亲鱼年龄为4～9冬龄，雄鱼4冬龄性成熟，可挤出精液，雌鱼5冬龄性成熟。雄鱼体型较长，雌鱼体型短粗，雌、雄鱼个体质量差异不明显，亲鱼体质量为4.0～8.0 kg。

1.2.1 受精卵获得及孵化 人工繁殖试验在2021年6月25日进行。催产药物和剂量为1 000 IU/kg的绒毛膜促性腺激素(HCG)+12 μg/kg的促黄体生成素释放激素类似物(LHRH-A2)+8 mg/kg的地欧酮(DOM)。雌鱼采用胸鳍基部两次注射的方法，第一次剂量为总量的1/3，两次注射间隔6 h。雄鱼进行一次注射，只注射DOM和LHRH-A2，剂量为雌鱼注射总量的1/2。水温为(30±0.5)℃时，效应时间为15～17 h。采用干法授精，将受精卵均匀附着在尼龙网片上，把网片浸入300 L的水槽中，微流水并充气孵化，直至孵出鱼苗。

1.2.2 胚胎发育观察 取少量刚受精的受精卵置于培养皿内，在解剖镜(桂光xtl400)下进行胚胎发育观察。水温控制在(30±0.5)℃，每次取受精卵50粒以上，培养皿中的水每隔2 h更换一次，从产卵受精后，每隔15 min对同一批受精卵观察和记录发育时序并进行拍照。胚胎发育分期方法参考洪孝友等[3]的分期标准，胚胎发育期划分以个体发育数达50%为准。

1.2.3 温度对胚胎发育的影响 利用宁波江南仪器厂生产的4台生化培养箱(SPM-50)，用经过计量的水银温度计标定，分别设置(24±0.5)、(27±0.5)、(30±0.5)、(33±0.5)℃ 4个孵化温度。参考陈昆慈等[4]的方法，孵化用培养皿直径为12 cm，每个培养皿可容纳100粒受精卵。每个温度下设置3个平行。定时观察、记录胚胎发育的各个阶段，并统计孵化率及仔鱼出膜时间和数量。

1.2.4 盐度对胚胎发育的影响 利用生化培养箱，孵化温度为(27.0±0.5)℃，分别设置0、2、4、6、8、10、11、12等8个盐度。每个孵化培养皿可容纳100粒受精卵，每个盐度下设置3个平行。在同一温度下定时观察、记录胚胎发育的各个阶段，并统计孵化率。胚胎发育结束后，记录不同盐度下出膜仔鱼游动活力。

1.2.5 仔稚鱼发育观察 在室内玻璃钢水槽中进行仔鱼培育。玻璃钢水槽规格为3.5 m×0.75 m×0.65 m，培育密度为29 411 尾/m3。早期仔鱼投喂丰年虫，10 d后投喂甲鱼粉料，每日3次。稚鱼期后被移入室外水泥池(7 m×3 m×1.5 m)培育，培育密度为472 尾/m3，期间投喂甲鱼粉料，25 d左右开始投喂膨化饲料，每日3次。自低眼巨鲶孵化出膜后，每天随机取正常个体10尾以上，在解剖镜(桂光xtl400)下进行观察。使用游标卡尺(Ahead 10-15475)测量全长、体长、体高、卵黄囊长径和短径等指标，用电子天平(上海力辰YP20001B)称量鱼体质量，用相机(Nikon D90)记录仔稚鱼发育过程中的变化情况。

1.2.6 繁殖效率评价

受精率=原肠中期活卵数/产卵总数×100%，

(1)

孵化率=孵出仔鱼苗数/受精卵总数×100%。

(2)

1.2.7 生长模型的确定 用线性回归方法推算低眼巨鲶早期生长的线性回归方程。

参照Blaxter等[5]的方法，计算卵黄囊体积(V，mm3)，即

V=4/3π×R/2×(r/2)2。

(3)

式中：R为卵黄囊长径(mm)；r为卵黄囊短径(mm)。

参照Benot等[6]的方法，建立低眼巨鲶仔稚鱼卵黄囊体积与出膜时间或全长与日龄的关系方程：

y=ax3+bx2+cx+d。

(4)

式中：x为生长时间(h或d)；y为全长(mm)或卵黄囊体积(mm3)；a、b、c、d为常数，且a≠0。

胚胎和仔稚鱼发育图片采用Photoshop CS 6软件进行编辑。各项形态学指标数据使用GraphPad Prism 8进行分析。试验数据均以平均值±标准差(mean±S.D.)表示，显著性水平设为0.05。

低眼巨鲶鱼卵透明，遇水有较强的黏性，为黏性卵，卵径为(1.60±0.23)mm。水温为(30±0.5)℃时，受精卵22 h开始孵化出膜，28～30 h全部孵化出膜。低眼巨鲶的发育期分为受精卵期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期和孵出期7个阶段。各发育时期的形态特征见图1。

A—受精卵；B—胚盘隆起；C—2细胞期；D—4 细胞期；E—8细胞期；F—16细胞期；G—32细胞期；H—64细胞期；I—多细胞期；J—囊胚早期；K—囊胚中期；L—囊胚晚期；M—原肠早期；N—原肠中期；O—原肠晚期；P—神经胚；Q—胚孔封闭期；R—肌节期；S—眼基出现期；T—尾芽期；U—肌肉效应期；V—心跳期；W—出膜仔鱼。A—fertilized egg；B—blastodisc formation；C—2 cell stage；D—4 cell stage；E—8 cell stage；F—16 cell stage；G—32 cell stage；H—64 cell stage；I—multi cell stage；J—high blastula stage；K—middle blastula stage；L—low blastula stage；M—early gastrula stage；N—middle gastrula stage；O—late gastrula stage；P—neural；Q—closure of blastopore；R—myomere stage；S—optic vesicle stage；T—tail bud stage；U—muscular effect stage；V—heart beating stage；W—newly hatched larva.图1 低眼巨鲶胚胎发育过程Fig.1 Embryonic development of Pangasianodon hypophthalmus

2.1.1 受精卵期(0～20 min) 受精完成后形成受精卵(图1A)，受精卵为黏性卵，卵母细胞受精后，原生质向动物极移动与卵黄分离，在动物极可以观察到隆起的胚盘结构(图1B)。

2.1.2 卵裂期(20 min～3 h) 受精卵发育20 min后开始分裂，受精40 min后胚盘在动物极分裂成两个大小相等的细胞(图1C)；随后两细胞也进行分裂，受精50 min后形成4个大小相似的细胞，进入4细胞期(图1D)；受精1 h后形成8个大小略有不同的细胞，进入8细胞期(图1E)，受精1 h 15 min后进入16细胞期(图1F)；16细胞期后，细胞不断分裂，分裂方式相对不规则，受精1 h 30 min后进入32细胞期(图1G)；受精1 h 45 min后进入64细胞期(图1H)；随后不断分裂，受精2 h 15 min后进入多细胞期(图1I)，细胞数量越来越多，细胞间间隔从清晰可见到逐渐模糊，开始进入囊胚期。

2.1.3 囊胚期(3 h～4 h 45 min) 进入囊胚期后细胞不断分裂，细胞界限模糊，受精3 h后，在动物极分裂的细胞不断聚集，形成帽状囊胚，进入囊胚早期(图1J)；随后受精卵在囊胚期不断分裂，动物极囊胚的细胞团不断发育，逐渐向扁平发展，受精3 h 30 min后进入囊胚中期(图1K)；随后囊胚期突起部分向四周扩展，受精4 h后进入囊胚晚期(图1L)。

2.1.4 原肠胚期(4 h 45 min～7 h) 受精4 h 45 min后，胚盘继续向植物极方向下包，形成胚环的雏形，达到原肠胚早期(图1M)；受精5 h 55 min后，胚层细胞下包约整个卵黄的1/2，胚环更加明显，进入原肠中期(图1N)；受精6 h 30 min后，胚层下包覆盖卵黄囊约4/5，胚盾拉长，进入原肠末期(图1O)。

2.1.5 神经胚期(7 h～9 h 15 min) 受精7 h 后，植物极的大部分被胚层包围，进入神经胚期(图1P)；随后外胚层不断分化，受精8 h后，外胚层形成神经板与卵黄栓，随着外包不断进行，卵黄被完全包裹，进入胚孔封闭期(图1Q)。

2.1.6 器官形成期(9 h 15 min～22 h 15 min) 受精卵在胚孔封闭期后继续发育进入器官形成期，受精9 h 55 min后，背部体节开始出现肌节(图1R)；受精11 h 30 min后，在脑的两侧出现圆形泡状结构，形成眼原基(图1S)；受精14 h 35 min后，尾芽发生明显分化，逐渐离开卵黄囊(图1T)；受精17 h 45 min后，肌肉发生间歇性收缩，进入肌肉效应期(图1U)；受精20 h 10 min后，胚胎心脏持续跳动，可见血液流动，胚体在卵膜内不停转动，器官发育完全(图1V)。

2.1.7 孵出期(22 h 15 min～28 h) 受精22 h 15 min后，卵膜开始溶解破裂，胚胎陆续脱离卵膜，出膜仔鱼无色素，卵黄囊透明位于鱼体下方，鱼鳍发育不完全，可以在水中间歇性游动(图1W)。具体胚胎发育时序见表1。

表1 低眼巨鲶胚胎发育时序

Tab.1 Time profile of embryonic development in Pangasianodon hypophthalmus

胚胎发育时期stage of embryonic development受精后时间 time after fertilization图序 figure No.受精卵期 fertilized egg stage图1A2细胞期2 cell stage40 min图1C4细胞期4 cell stage50 min图1D8细胞期8 cell stage1 h图1E卵裂期cleavage phase16细胞期16 cell stage1 h 15 min图1F32细胞期32 cell stage1 h 30 min图1G64细胞期64 cell stage1 h 45 min图1H多细胞期 mulberry embryos2 h 15 min图1I囊胚早期 high blastula stage3 h图1J 囊胚期blastula stage囊胚中期middle blastula stage3 h 30 min图1K囊胚晚期 low blastula stage4 h图1L原肠早期 early gastrula stage4 h 45 min图1M 原肠期gastrula stage原肠中期middle gastrula stage5 h 55 min图1N原肠晚期 late gastrula stage6 h 30 min图1O神经胚期神经胚neurula7 h图1Pneurula stage胚孔封闭期 closure of blastopore8 h图1Q肌节期muscle burl stage9 h 55 min图1R眼基出现期optic vesicle stage11 h 30 min图1S器官形成期organogene-sis stage尾芽期tail bud stage14 h 35 min图1T肌肉效应期 muscular effect stage17 h 45 min图1U心跳期 heart beating stage20 h 10 min图1V 孵出期hatching stage出膜仔鱼newly hatched larva22 h 15 min图1W

从表2可见：随水温升高，孵化率呈先升高后降低的趋势，最适孵化温度为(27～30)℃，温度过高或过低均会严重降低孵化率；温度对低眼巨鲶的出膜时间也具有显著影响(P

表2 温度对低眼巨鲶胚胎孵化率的影响

Tab.2 Effects of temperature on hatching rate of embryo in Pangasianodon hypophthalmus

温度/℃temperature胚胎发育停止时期 embryonic development stop period孵化率/%hatchability畸形率/%deformity rate出膜时间/hhatching time24肌节期24.42±2.00a36.50±0.50a27发育正常49.35±4.33b28.25±0.36b30发育正常44.33±6.69ab22.25±0.14c33发育正常36.32±4.50ab7.12±5.3218.67±0.21d

注：同列中标有不同字母者表示组间有显著性差异(PP>0.05)，下同。

Note：The means with different letters within the same column are significantly different in the groups at the 0.05 probability level，and the means with the same letter within the same column are not significant differences，et sequentia.

从表3可见：随盐度升高，低眼巨鲶孵化率呈下降趋势，水体盐度为0时孵化率最高(54.33%)；盐度为10时孵化率仅为14.67%；盐度为10以上时低眼巨鲶全部死亡，无法进行正常的胚胎发育。

表3 盐度对低眼巨鲶胚胎孵化率的影响

Tab.3 Effects of salinity on embryo hatching rates in the Pangasianodon hypophthalmus

盐度salinity胚胎发育停止时期embryonic development stop period孵化率/%hatchability活力vitality0发育正常54.33±0.57a+++2发育正常35.05±0.43c+++4发育正常38.76±1.52b+++6发育正常31.21±0.86d+++8发育正常24.76±0.34e+10发育正常14.67±0.36f+11原肠期——12原肠期——

注：—，不成活；+，游动能力弱；+++，游动能力强。

Note：—，no survival；+，weak swimming ability；+++，strong.

初孵仔鱼在自然温度(水温27～32 ℃)下，经历前期仔鱼(0～2 d)、后期仔鱼(3～16 d)和稚鱼(17～29 d)，随后进入幼鱼期(30 d)(图2、表4)，刚孵化出仔鱼和1日龄仔鱼的形态指标均统计20尾，其他日龄仔鱼、稚鱼和幼鱼的形态指标均统计10尾。

表4 低眼巨鲶仔稚鱼发育过程形态学数据

Tab.4 Morphological measurement of larval development in Pangasianodon hypophthalmus

出膜后时间/dday post hatching全长/mmtotal length体长/mmbody length体高/mmbody height肛前长/mmpreanal length04.38± 0.233.90±0.341.73±0.7816.64±0.576.34±0.543.06±0.3427.05±0.466.68±0.163.25±0.3037.84±0.477.56±0.373.83±0.3649.50±1.328.55±1.044.53±0.70510.36±1.109.54±0.744.89±0.70610.30±0.749.17±0.345.22±0.53711.69±1.6910.16±1.491.12±0.455.40±0.97812.10±1.3310.53±1.221.16±0.355.66±0.89911.64±1.889.56±1.041.36±0.464.87±0.941011.40±1.219.67±0.941.44±0.325.08±0.711113.40±1.4211.16±1.131.39±0.415.84±0.721514.84±2.5711.60±2.092.52±0.406.50±1.211716.38±2.1313.56±1.652.92±0.407.17±1.202021.18±0.9516.87±0.504.65±0.589.56±0.692334.66±1.9828.67±1.836.77±0.7415.61±1.342849.43±9.6842.01±7.4110.61±2.8719.49±3.213053.65±11.2744.71±10.3910.58±3.0220.39±5.28

A—1日龄仔鱼；B—2日龄仔鱼；C—3日龄仔鱼；D—4日龄仔鱼；E—5日龄仔鱼；F—6日龄仔鱼；G—7日龄仔鱼；H—8日龄仔鱼；I—9日龄仔鱼；J—11日龄仔鱼；K—12日龄仔鱼；L—13日龄仔鱼；M—15日龄仔鱼；N—17日龄稚鱼；O—20日龄稚鱼；P—23日龄稚鱼；Q—28日龄稚鱼；R—30日龄幼鱼。A—1 dph(day post hatching)larva；B—2 dph larva；C—3 dph larva；D—4 dph larva；E—5 dph larva；F—6 dph larva；G—7 dph larva；H—8 dph larva；I—9 dph larva；J—11 dph larva；K—12 dph larva；L—13 dph larva；M—15 dph larva；N—17 dph juvenile；O—20 dph juvenile；P—23 dph juvenile；Q—28 dph juvenile；R—30 dph juvenile.图2 低眼巨鲶仔稚鱼形态发育Fig.2 Morphological development of larvae and juvenile of Pangasianodon hypohthalmus

2.4.1 前期仔鱼 刚出膜仔鱼全长为(4.38± 0.23)mm，卵黄囊呈椭圆形，长径为(2.01±0.65)mm，短径为(1.18±0.31)mm，卵黄囊体积为(1.34±0.69)mm3。卵黄囊长径长约为仔鱼全长的1/4。听囊内2个耳石清晰可见，卵黄膜边缘上有色素累积，肠道细直，肛门封闭，晶状体为黑色球状(图1W)。

1日龄仔鱼，全长为(6.64±0.57)mm，长径为(1.04±0.21)mm，短径为(0.42±0.24)mm，卵黄囊体积为(0.25±0.18)mm3。鳃原基明显，口裂清晰，晶状体黑色素增多，卵黄囊继续缩小，肠道持续发育(图2A)。

2日龄仔鱼，全长为(7.05±0.46)mm，卵黄囊体积为(0.08±0.04)mm3，脑腔扩大，脑部开始发育，自脑部延伸出脊索神经。围心腔扩大，心脏跳动清晰可见。此时，仔鱼已会简单游动，有躲避能力，出现相互攻击的现象(图2B)。

2.4.2 后期仔鱼 3日龄仔鱼，全长为(7.84±0.47)mm，口裂为(0.64±0.11)mm，仔鱼卵黄囊已经被完全吸收，开始转化为外源性营养，仔鱼可以自行摄食，可见脂鳍与臀鳍原基，尾鳍开始分化，下鳍骨开始发育，出现两对须(图2C)。

4日龄仔鱼，全长为(9.50±1.32)mm，口裂为(0.85±0.14)mm，肠道内充满食物，仔鱼可以完全独立摄食，背鳍开始发育，体侧上下出现两道黑色淡纹，眼球呈黑色(图2D)。

5日龄仔鱼，全长为(10.36±1.1)mm，口裂为(0.85±0.10)mm，食物充满肠道，鳔变大为椭圆形，鱼体侧上下星状黑色色素增多，鳃部发育呈红色(图2E)。

6日龄仔鱼，全长为(10.30±0.74)mm，口裂为(0.87±0.15)mm，鳔拉长，脂鳍继续发育，尾鳍鳍条出现(图2F)。

7日龄仔鱼，全长为(11.69±1.69)mm，背鳍的棘条开始发育，消化系统出现明显分化，晶状体清晰可见，血液等循环系统逐步发育(图2G)。

8日龄仔鱼，全长为(12.10±1.33)mm，头部、鳃盖的色素细胞不断聚集，心脏及全身血液、血管清晰可见，背鳍继续发育，尾鳍、臀鳍鳍条发育明显，胸鳍、腹鳍开始出现(图2H)。

9日龄仔鱼，全长为(11.64±1.88)mm，头部鳃盖及第背鳍色素细胞不断增加，背鳍、脂鳍、臀鳍、尾鳍、腹鳍和胸鳍发育成形(图2I)。

10日龄仔鱼，全长为(11.40±1.21)mm。

11日龄仔鱼，全长为(13.40±1.42)mm，鱼体加宽，颅骨加厚不再透明，颊部、颏部色素细胞继续增多，肌肉组织清晰可见(图2J)。

15日龄仔鱼，全长为(14.84±2.57)mm，仔鱼各个鱼鳍发育完全，生长发育差异明显，消化循环系统发育完整，进入稚鱼期(图2M)。

2.4.3 稚鱼期 17日龄稚鱼，全长为(16.38±2.13)mm，体呈黑色，各鳍鳍条形成，背鳍、尾鳍和臀鳍边缘呈黑色，头部、腹部呈青色，与成鱼类似(图2N)。

20日龄稚鱼，全长为(21.18±0.95)mm，侧线上下出现明显的白色条纹，背鳍鳍棘继续发育，脂鳍不断延长(图2O)。

23日龄稚鱼，全长为(34.66±1.98)mm，稚鱼发育逐渐完善，侧线上下有两道明显的斑纹，鳍条呈黑色，与成鱼一致(图2P)。

28日龄稚鱼，全长为(49.43±9.68)mm，稚鱼发育完全，体色与成鱼一致，侧线上下两道条纹呈浅灰色，臀鳍和尾鳍上均有深黑色的斑纹。开始进入幼鱼期(图2Q)。

2.4.4 幼鱼期 30日龄幼鱼，全长为(53.65±11.27)mm，体质量为(1.4±0.3)g，进入幼鱼期，具成鱼形态(图2R)。

2.4.5 卵黄囊体积变化 根据式(3)计算低眼巨鲶卵黄囊的体积(mm3)，再拟合得到卵黄囊体积(V)与出膜后时间(x)的回归方程：

V=0.000 7x2-0.057 5x+1.166 4 (R2=0.967 6)。

从图3可见，低眼巨鲶卵黄囊前期吸收较快，30 h时已经被吸收80%多，30 h以后吸收速度缓慢，72 h后卵黄囊才完全消失。

图3 低眼巨鲶仔鱼卵黄囊体积的变化Fig.3 Volume changes of yolk sac in Pangasianodon hypophthalmus larvae

2.4.6 仔稚鱼生长模型 对低眼巨鲶仔稚鱼的全长(L)和日龄(x)进行回归分析，得到仔稚鱼生长模型方程：

L=0.002x3-0.019 3x2+0.493 7x+

6.647 5(R2=0.978 5)。

从图4可见，低眼巨鲶仔鱼前期生长较慢，培育20 d 后开始增速，30 d 时全长就可达到(53.65±11.27)mm。

图4 低眼巨鲶的全长生长曲线Fig.4 Total length of Pangasianodon hypophthalmus

低眼巨鲶怀卵量大，胚胎发育快。一尾雌鱼怀卵量约为30万粒，其卵粒小，卵径仅为(1.60±0.23)mm，与同属的苏氏圆腹鱼芒(Pangasius sutchi)卵径为1.20～1.80 mm[7]、细尾巨鲶(Pangasius nasutus)卵径为1.4～1.6 mm[8]和施氏油鲶(Steindachneridion parahybae)卵径为(1.90±0.4)mm[9]基本相似。与同目的黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)卵径为2.20 mm[10]和斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)卵径为4.2～4.5 mm[11]相比，低眼巨鲶卵粒偏小，这与其怀卵量较大的特点是相适应的。

低眼巨鲶最佳孵化水温为 27～30 ℃，温度越高，胚胎发育越快，反之越慢。30 ℃时出膜时间为 22 h 15 min，27 ℃时出膜时间为28 h 15 min，与同属的苏式圆腹鱼芒[12]出膜时间为24 h 18 min的结果相近。在相近温度下，四带小鲃(Puntius tetrazona)[13]出膜需要 24 h，军曹鱼(Rachycentron canadum)[14]出膜需要 26 h，翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)[15]则需要 38 h。这表明，低眼巨鲶作为热水性鱼类，具有卵径小、所需孵化水温高和胚胎发育时间短的特点。

盐度对鱼类的胚胎发育有较大的影响[16]，适宜的盐度会提升胚胎的存活能力及孵化率。低眼巨鲶在盐度为0时孵化率最高，在盐度为2～10时孵化率逐步降低，盐度为10以上时胚胎发育畸形或无法正常发育，这与Farhana等[17]的研究结果相近。这表明，低眼巨鲶是一种适宜在淡水中生长发育的鱼类。

低眼巨鲶仔稚鱼发育具有明显的热水性鱼类特点。参照王武[18]提出的分期标准，本研究中根据低眼巨鲶卵黄囊、体色、鳍条及其他形态结构变化，将其胚后发育划分为3个时期(仔鱼期、稚鱼期和幼鱼期)，其中，仔鱼期和稚鱼期的划分以各鳍条是否形成为依据，同时根据卵黄囊的吸收情况将仔鱼期划分为前期仔鱼和后期仔鱼；当低眼巨鲶稚鱼发育完全，体表颜色与成鱼一致，外观整体上与成鱼相似时，表明其进入幼鱼期。

本研究中显示，在水温为27～32 ℃时，前期仔鱼孵化后第2天开始摄食并有攻击行为，第3天时完成卵黄吸收，这表明，低眼巨鲶从内源能量依赖期向外源能量依赖期的转换只有1 d，这与Morioka等[19]的研究结果一致。仔鱼在卵黄囊存在期间，从内源营养开始逐渐转化为外源营养，为内源和外源营养混合期，此阶段卵黄囊吸收变化不大，这种现象在其他鱼类中也存在。相比而言，鲤形目的四川华鳊(Sinibrama taeniatus)[20]卵黄囊完全消耗需要4～5 d，倒 刺 鲃(Spinibarbus denticulatus)[21]卵黄囊消失则需7 d，而鲑形目的哲罗鱼(Hucho taimen)[22]需要27 d卵黄囊才能完全消耗。低眼巨鲶作为热水性鱼类，其快速吸收卵黄囊并迅速开始摄食的营养方式，与其生长环境相适应。这种营养方式能够使其生长迅速并能较快地适应生长环境。

本研究中观察发现，卵黄囊消失进入后期仔鱼，后期仔鱼已经能完全开口摄食，脂鳍和尾鳍首先发育，随后臀鳍发育，最后背鳍、胸鳍和腹鳍依次发育，最终运动器官逐步发育完全，体型逐渐接近幼鱼，器官基本发育完全，随后进入幼鱼期。幼鱼期与成鱼体型变化不大，体长、体质量在幼鱼期均快速增长。低眼巨鲶的仔稚鱼发育模式与黄颡鱼[23]、马口鱼(Opsariichthys bidens)[24]和胡子鲇(Clarias fuscus)[25]等相近。

低眼巨鲶生长较快速，属于快速生长的鱼类。低眼巨鲶早期生长与黄颡鱼[26]和密斯特黄彩鲇(Mystus sp.)[27]等鲇形目鱼类生长模式相近，均呈现出早期生长缓慢、后期生长速度加快的模式。本研究中，低眼巨鲶仔稚鱼前期生长较慢，培育 20 d后开始增速，30 d时全长几乎达到 6 cm。与许多鱼类物种相比，如黄颡鱼、密斯特黄彩鲇的仔鱼培育30 d时全长仅能达到 3 cm，低眼巨鲶属于生长较快的物种。

本研究中观察发现，低眼巨鲶仔稚鱼发育过程中，低眼巨鲶仔鱼孵化后2～3 d就有明显的互相残食行为，这与Morioka等[19]的研究结果一致。在此阶段，仔鱼眼睛完全发育且黑色素明显，卵黄迅速减少并被完全吸收，出现牙齿和胡须，游泳能力显著增强。仔鱼个体之间能互相攻击，且发生残食的现象，这与仔鱼形态和器官发育程度高度吻合。鲇形目鱼类天生有互相残食的习性[28]，本研究中观察发现，在高密度、饵料不足及个体规格差异较大时，低眼巨鲶幼体之间残食更明显，这与对其他鱼类的研究结果相似[29]。因此，在苗种培育生产时，放养密度适当，饵料充足，及时分级饲养，可提高苗种培育成活率。

1)低眼巨鲶卵为黏性卵，透明，卵径小。孵化期短，在水温为(30±0.5)℃ 时需22 h 15 min孵出。最佳孵化温度为 27～30 ℃，最适盐度为0。表明其为典型的热水性纯淡水鱼类。

2)低眼巨鲶刚出膜仔鱼小，全长仅有(4.38± 0.23)mm。初孵仔鱼出膜后第3天卵黄囊消失，出膜后第2天开始摄食，并互相残食。仔鱼前期生长较慢，20 d后开始增速，30 d时全长达到(53.65±11.27)mm，表明其属于快速生长的鱼类。

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NI Wei1，2，CHEN Haigang1，LIU Xiaoli1，YU Lingyun1，LI Wei1，HONG Xiaoyou1，LIU Yihui1*，ZHU Xinping1，2*

(1.Key Laboratory of Tropical &Subtropical Fishery Resource Application &Cultivation，Ministry of Agriculture and Rural Affairs，Pearl River Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences，Guangzhou 510380，China；2.College of Life Science and Fisheries，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306，China)

Abstract：To elaborate embryonic development and growth of larval and juvenile basa fish striped catfish (Pangasianodon hypophthalmus), the fertilized eggs were obtained from spawners with body weight of 4.0-8.0 kg by hormone injection and artificial insemination and the developmental characteristics of the embryos were observed. The effects of water temperature [(24±0.5), (27±0.5), (30±0.5), and (33±0.5)]℃ and salinity of 0, 2, 4, 6, 8, 10, 11, and 12 on the embryonic development were investigated in a biochemical incubator (SPM-50). The fertilized eggs are transparent viscid egg with diameter of (1.60±0.23)mm, and the embryonic development process was divided into 7 stages at water temperature of (30±0.5)℃, including fertilized egg, cleavage, blastula, gastrula, neurula, organogenesis and hatching (totally 23 developing periods). It began to hatch after 22 hours at water temperature of (30±0.5)℃, and all hatched in 28 hours. The newly hatched larvae had total length (TL) of (4.38± 0.23)mm at the water temperature of (30±0.5)℃. It was found that 27 ℃ to 30 ℃ was of the optimum incubation water temperature,with the maximal hatching rate from 49.35% to 44.33%, and that 0 of the optimum salinity, with the maximal hatching rate of 54.33%. It was found that as the salinity increased, the hatching rate gradually decreased. Under the condition of water temperature at (30±0.5)℃, the striped catfish as a tropical fish grew and developed into the fingerling stages (30 d) via the pre-larvae (0-2 d), post larvae (3-16 d), and juvenile (17-29 d). The yolk sac was exhausted completely on the third day post hatching, with a short incubation period. The finding indicates that the striped catfish has a short incubation period and is typical warm-water freshwater fish. The optimal hatching temperature was found to be 27 to 30 ℃, and the most suitable salinity was 0. The larvae and juveniles exhibited slow growth in the early stages, but after 20 days, they started to grow rapidly, classifying them as fast-growing fish.

Key words：Pangasianodon hypophthalus; embryonic development; larva and juvenile; temperature; growth

DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2022-313

文章编号：2095-1388(2023)04-0584-09

中图分类号：S 965.1

文献标志码：A

收稿日期：2022-10-20

基金项目：中国水产科学研究院院级基本科研业务费专项(2020XT11)；广东省现代农业产业技术体系创新团队建设项目(2019KJ150)；中国-东盟海上合作基金资助(CAMC-2018F)

作者简介：倪未(1997—)，男，硕士研究生。E-mail：[email protected]

通信作者：

朱新平(1964—)，男，博士，研究员。 E-mail：[email protected]

刘毅辉(1973—)，男，副研究员。E-mail：[email protected]