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概述
什么是外泌体？ 外泌体分离与富集 外泌体鉴定与分析 外泌体鉴定相关抗体外泌体功能研究 肿瘤相关外泌体蛋白标志物 什么是外泌体？外泌体是细胞外脂质纳米囊泡，大小约为 30-150 nm，在大多数活细胞中通过胞吐作用主动分泌，存在于所有体液中，如血浆、尿液、血清、唾液和脑脊液 (CSF)等。 外泌体含有脂质双分子膜结构，携带典型的跨膜蛋白和受体、粘附分子、脂筏相关蛋白、免疫调节分子。在外泌体腔内，可以发现多种蛋白质和核酸，根据不同的细胞类型而不同。 作为细胞间通讯的关键信使，外泌体将生物活性分子传递给受体细胞，从而参与多种病理生理过程，包括肿瘤、心血管疾病和神经退行性疾病等。有一系列研究报道了肿瘤来源的外泌体在肿瘤进展、免疫调节和转移中的预后发挥重要功能。1 也有越来越多的证据表明，外泌体可用于早期癌症检测、预后和指导治疗。2 外泌体分离与富集分离外泌体有许多种方法，每种方法都有自己的优点和局限性。但目前没有公认的分离方法，需要根据实验目标来选择3。 外泌体分离的常用方法及比较 外泌体分离与分析工具外泌体分离用免疫微球（无需预纯化）通过乳胶免疫微球与抗外泌体表面抗原的抗体共价偶联，捕获总外泌体群体或富集来自特定亚群的外泌体。 所需样本体积小：血清(100-500μL), 血浆(0.5-1mL)操作简单，无需超速离心，无需预纯化捕获了外泌体的微球可直接进行核酸提取和蛋白的分析可通过洗脱缓冲液分离外泌体和微球洗脱的微球可重复利用一次产品名称 货号 样品类型 说明 1.0 micron Immunobeads ab288113 血浆、血清、尿液 用于外泌体分离 外泌体捕获和定量试剂盒（无需预纯化）abcam提供总外泌体捕获和定量试剂盒，基于外泌体表面标志物与特异性抗体结合，通过专利的双夹心酶联免疫检测，可对来自少量人体生物体液或细胞培养基的外泌体进行定量和定性分析。 样本体积小：100μL 生物样品（非纯化的外泌体）操作简单，无需超速离心，无需预纯化检测灵敏度高于Western Blot，最低可检测0.39μg 冻干外泌体适用于多标marker分析产品名称 货号 检测方法 样品类型 种属反应性 说明 Overall Exosome Capture and Quantification Assay Kit ab287851 比色法 细胞培养上清 Human 用于细胞培养上清中外泌体的定量及定性分析。 Overall Exosome Capture and Quantification Assay Kit (Human Serum, Colorimetric) ab287861 比色法 血清 Human 用于人血清中外泌体的定量及定性分析。 Overall Exosome Capture and Quantification ELISA Assay Kit ab285284 比色法 血浆 Human 用于人血浆中外泌体的定量及定性分析。 ExoFACS试剂盒abcam ExoFACS试剂盒可以从细胞培养基中分离外泌体，并通过流式对外泌体进行表征分析。 含阳性对照标准品无需外泌体预纯化适用于多标记Marker分析产品名称 货号 检测方法 样品类型 种属反应性 ExoFACS Kit ab287876 流式 细胞培养上清 Human 外泌体分离及流式分析试工具（需预富集）操作简便——采用免疫磁珠分离法，将样品与磁珠、检测抗体混合，使用磁座进行简单分离后，加入荧光检测抗体，即可通过流式细胞仪对捕获的外泌体进行分析。 高度灵活——搭配不同的检测抗体即可进行外泌体免疫分型分析。 适用一种或多种样本——细胞培养上清及血浆、尿液等⽣物体液样本均有相应产品适用。 良好的线性关系——可搭配使用外泌体标准品绘制标准曲线，定量结果更准确。 Beads 产品名称 货号 样品类型 检测方法 CD326 Exosome Capture Beads ab239688 细胞培养上清、血浆、 尿液 流式 CD9 Exosome Capture Beads ab239685 细胞培养上清、血浆、 尿液 流式 CD63 Exosome Capture Beads ab239686 细胞培养上清、血浆、 尿液 流式 D81 Exosome Capture Beads ab239687 细胞培养上清、血浆、 尿液 流式 试剂盒 产品名称 货号 检测方法 样品类型 种属反应性 说明 Exosome Isolation and Analysis Kit - Flow Cytometry, Cell culture (CD63 / CD9) ab267478 流式 细胞培养上清 Human 用于分离/检测CD63阳性的外泌体， Exosome Isolation and Analysis Kit- Flow Cytometry，Urine (CD63 / CD9) ab267480 流式 尿液 Human 用于分离/检测CD63阳性的外泌体 Exosome Isolation and Analysis Kit- Flow Cytometry，Plasma (CD9 / CD81) ab267479 流式 血浆、血清 Human 用于分离/检测CD9阳性的外泌体。 外泌体标准品实验对照及绘制标准曲线的最佳选择——abcam提供来自健康供体的人血浆、血清、尿液和唾液以及来自不同细胞系的高度纯化的冻干外泌体标准品，可作为实验对照或用于分析校准。 品质优良且稳定——通过NTA、流式、电镜等应用验证，品质优良可靠。 应用广泛——适用于不同技术进行蛋白标志物分析、外泌体核酸提取和分析、流式及电镜等分析。 abcam也提供荧光标记的外泌体标准品，用于荧光显微镜下的外泌体跟踪。绿色染料可提供稳定的荧光标记，具有持久清晰的信号。 外泌体标准品来源 货号 荧光标记 说明 Human Serum ab286846 Human Plasma ab288118 Human Plasma ab288123 是 Human Urine ab286884 U-87 MG cell line ab286885 cell line isolated from malignant gliomas from a patient MCF7 cell line ab239691 human breast cancer cell line PC3 cell line ab239689 human metastatic prostate cancer cell line HT-29 cell line. ab239690 human colon cancer cell line B16-F10 cell line ab288120 是 cell line isolated from skin tissue of a mouse with melanoma 为什么选择abcam外泌体标准品？abcam外泌体标准品使用超速离心和微孔过滤的组合步骤进行纯化。虽然方法繁琐且耗时，但它能保证外泌体的高纯度。通过微孔过滤和差速离心循环可以大大降低其他微泡的污染。相反，使用化学试剂沉淀外泌体，同时也会沉淀较大的囊泡、蛋白质复合体、蛋白质-RNA复合体等，导致样品纯度较低。冻干的形式还方便标准品的长期储存。 特点 abcam 外泌体标准品 某公司 外泌体标准体 每管的样品量 100 μg 50 μg 分离方法 超速离心和微孔过滤 沉淀试剂 Nanoparticles/mL（50ug人血清外泌体） 3.75x10^10 p/mL 2.29x10^9 p/mL 最终形式 Lyophilized（冻干） Frozen 存储温度 4°C （冻干形式） -20°C 保质期 3年 1年 外泌体鉴定与分析外泌体分离和定量完成后，需要对外泌体进行鉴定。根据国际细胞外囊泡研究协会（ISEV）针对囊泡研究提出的MISEV2018 指南（定义细胞外囊泡及功能的最低实验要求）细胞外囊泡（EVs，含外泌体）鉴定主要分为总体表征和个体表征两部分4： 总体表征蛋白鉴定建议用Western Blot或流式细胞术对阳性标志物和阴性标志物进行表征。要求至少包括1 个跨膜蛋白和1 个细胞溶质蛋白、1 个阴性蛋白质标志物。 个体表征粒径分析：应用动态光散射(DLS)或纳米颗粒跟踪分析(NTA)方法，对粒径分布进行分析。 形态表征：应用透射电子显微镜（TEM）或原子力显微镜（AFM）方法对EVs的形态及粒径进行表征。 外泌体鉴定相关抗体abcam提供高特异性、高灵敏度的外泌体标志物抗体。 靶标 货号 克隆号 应用 种属反应性 靶点说明 备注 组合(Calnexin，CD9，CD63，CD81，Hsp70，TSG101) ab275018 - - - Calnexin ab133615 EPR3633(2) Flow Cyt (Intra), WB, IHC-P Ms, Rat, Hu 阴性标志物，ER Membrane Marker 敲除验证 CD9 ab263019 EPR23105-125 IP, WB, IHC-P, Flow Cyt Hu 跨膜蛋白 敲除验证 ab286172 A1501 WB, ELISA, IHC-Fr, IP Hu CD63 ab134045 EPR5702 WB, IHC-P Hu 跨膜蛋白 敲除验证 CD81 ab109201 EPR4244 WB Ms, Rat, Hu 跨膜蛋白 ab286173 A1504 WB, ELISA, Flow Cyt Hu Hsp70 ab181606 EPR16892 Flow Cyt (Intra), IHC-P, WB, ICC/IF Ms, Rat, Hu 分子伴侣蛋白 TSG101 ab125011 EPR7130(B) Flow Cyt (Intra), IHC-P, WB, ICC/IF Ms, Rat, Hu ESCRT复合体相关蛋白 种属说明：Hu（Human）、Ms（Mouse）。 敲除验证：该标记表示abcam 以基因敲除细胞系做为阴性对照，对该产品进行了敲除验证，以确认抗体对目标蛋白的特异性。 外泌体功能研究肿瘤相关外泌体蛋白标志物abcam 提供高质量的肿瘤相关外泌体蛋白标志物抗体，可用于胰腺癌、黑色素瘤、肺癌、恶性胶质瘤、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、胆管癌等研究。点此下载《液体活检解决方案》，获取完整肿瘤相关外泌体蛋白标志物及抗体列表。 参考文献1. Ayuko Hoshino, Han Sang Kim, etc.. Extracellular Vesicle and Pa rticle Biomarkers Define Multiple Human Cancers. Cell. 2020 Aug 20; 182(4): 1044–1061.e18. 2. Chen IH, Xue L, etc.. Phosphoproteins in extracellular vesicles as candidate markers for breast cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2017 114, 3175–3180. 3. Shiyu Li, Ming Yi, etc.. The role of exosomes in liquid biopsy for cancer diagnosis and prognosis prediction. Int J Cancer. 2021 Jun 1; 148(11): 2640–2651. 4. Clotilde Théry, Kenneth W Witwer, etc.. Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (MISEV2018): a position statement of the International Society for Extracellular Vesicles and update of the MISEV2014 guidelines. J Extracell Vesicles. 2018 Nov 23;7(1):1535750. 5. Tao Huang and Chu-Xia Deng. Current Progresses of Exosomes as Cancer Diagnostic and Prognostic Biomarkers. Int J Biol Sci. 2019; 15(1): 1–11. 6. Bradbury A and Pluckthun A. Reproducibility: Standardize antibodies used in research. Nature. 518:27-29 (2015). 7. BenchSci. [Accessed 15/06/2020] (2020) 8. Zhong Z, Sassi M, Heaton S, Koch S, De Block G, Conlon D, Lochead J, Dreja H, Munro M, Solache A, Hamilton B. Large-scale use of knockout validation to confirm antibody specificity. J Immunol 200 (1 Supplement) 120.18 (2018). |
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