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细胞冻存指南

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尽快去除细胞中的冷冻保护剂且操作要尽量温和,以免长时间暴露于冷冻保护剂而造成损伤。去除冷冻保护剂的方法取决于保护剂类型和细胞类型——例如,对冷冻保护剂敏感的细胞需要通过温和的离心来去除。当使用甘油作为冷冻保护剂时,在解冻的细胞悬液中突然加入大量新鲜培养基会损伤细胞或导致细胞死亡。为避免上述情况,应当每10分钟使用等量的预热培养基对细胞进行稀释,分几次逐步完成,让细胞有时间调整,然后再进行后续操作。

一般而言,如果能在解冻后6至8小时内更换培养基,去除冷冻保护剂,大部分细胞均可正常复苏。

细胞成功冻存后,几乎无需维持,当细胞出现污染或意外时,可以随时取用。冻存细胞对于长期实验尤为有用,其休眠状态有助于确保生物学变异处于最低水平。



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