3.1.1 重组DNA技术的基本工具课件

学习目标1.掌握重组DNA技术所需的第一种基本工具和作用2.复习DNA的结构和基本单位

自学指导1：阅读67-71的“分子手术刀”，回答下列问题，限时3分钟1、阅读章首页，找出基因工程的概念并画出关键词。2、重组DNA分子过程中，分子工具有哪些？3、限制酶的来源、功能、切割部位、识别序列、切割结果是？4、完成P71的旁栏思考5、阅读资料卡，限制酶是如何命名的？

什么是基因工程？别名操作环境操作对象操作水平结果原理优点重组DNA技术生物体外基因符合人类需要的新的生物类型和生物产品基因重组克服远缘杂交不亲和障碍、定向改造生物性状DNA分子水平什么是基因工程？

理论基础1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.都遵循碱基互补配对原则3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构理论基础1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码基因工程的诞生理论基础【问题1】为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？【问题2】为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？

1.基因是什么？2.基因的功能是什么？基因通过控制蛋白质的合成，直接或间接控制生物的性状。转录DNAmRNA蛋白质翻译（RNA聚合酶）——体现相关的生物性状知识回顾——基因基因是有遗传效应的DNA片段。基因是控制生物性状的基本单位

①组成元素:②DNA中文全称:③基本单位:脱氧核糖核酸CHONP脱氧核糖核苷酸=磷酸+脱氧核糖+含氮碱基脱氧核糖含氮碱基磷酸1′4′3′2′5′ATGC脱氧核苷酸(4种)知识回顾——DNA鸟嘌呤脱氧核苷酸胞嘧啶脱氧核苷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸

脱氧核糖A磷酸脱氧核糖G磷酸脱氧核糖T磷酸T磷酸脱氧核糖C磷酸脱氧核糖A磷酸脱氧核糖氢键磷酸二酯键脱氧核苷酸如何链接成脱氧核苷酸链的呢？知识回顾——DNA

双螺旋结构知识回顾——DNA

DNA的结构特点：5’3’3’5’②和交替连接，排列在外侧，构成；排列在内侧。③两条链上的碱基通过连接成碱基对，且遵循。①DNA是由两条单链组成的，这两条链按方式盘旋成双螺旋结构。反向平行脱氧核糖磷酸碱基基本骨架氢键碱基互补配对原则知识回顾——DNA

……ATGCCGTGGAATTCC…………TACGGCACCTTAAGG……①②①磷酸二酯键②氢键简图：

基因工程分子工具0102“分子手术刀”“分子缝合针”03“分子运输车”

1201“分子手术刀”----限制性内切核酸酶1、来源：2、种类：主要来自原核生物3、切割部位：数千种能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。（限制酶不是一种酶，而是一类酶）根据你所掌握的知识你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么？限制酶就是细菌中的一种防御性工具，主要起到切割外源DNA使之失效，从而达到保护自身的目的。旁栏思考?①②

EcoRISma性末端平末端被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。DNA两条单链的切口，是平整的4、切割结果：

5.识别序列的特点：(2)限制酶所识别的序列，呈碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。(1)限制酶具有专一性。一种限制酶一般只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。(3)同一种限制酶一定能切出相同的粘性末端，相同的粘性末端不一定来自用一种限制酶的切割，但同样能相互连接。回文序列几种常见的限制酶的识别序列及切割位点：

15【反馈练习】1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（）A．GAATTCB．GGGGCCCCCTTAAGCCCCGGGGC．CTGCAGD．CTAAATCGACGTCGATTTAGD

BamHⅠ;EcoRⅠ;HindⅢ;BglⅡ。写出下列限制酶切割形