第二讲：流式细胞术原理FSC与SSC

第⼆讲：流式细胞术原理

FSC

与

SSC

我们在

第⼀讲：流式细胞术概述

中介绍了流式细胞术是什么，能够检测哪些样本的哪些参数，

三⼤系统以及数据的呈现形式；另外，我们前段时间为⼤家分享了

常⽤流式细胞仪荧光参数

。

这⼀讲，实验⼩⽩为⼤家简单介绍⼀下流式细胞术的基本原理以及

FSC

和

SSC

这两个参数的⽤

处。

流式细胞术原理

在⼀定的压⼒下，鞘液带着细胞通过喷嘴中⼼进⼊到流式照射室，在流式照射室的分析点，激

光照射到细胞发⽣散射和折射，发射出散射光（包括前向散射光和侧向散射光）；同时细胞所

携带的荧光素被激光激发并发射出荧光。

前向散射光（

Forward scatter, FSC

）和侧向散射光（

side scatter, SSC

）检测器把散射光转变

成电信号。⽽荧光则被聚光器收集，不同颜⾊的荧光被双⾊反光镜转向不同的光电倍增检测

器，把荧光信号也转变成电信号。这些电信号再经过数据化处理后输⼊电脑并储存，即可对细

胞进⾏分析或分选。

流式细胞术中的三⼤系统

根据⼯作原理，流式可以划分为液流系统、光学检测系统和电⼦控制系统三⼤系统：

液流系统：流动室及液流驱动系统。

光学检测系统：激光光源及光束形成系统；聚焦光源透镜、各种滤光⽚；光电倍增管（

PMT

）

收集不同波长荧光信号。

电⼦控制系统：荧光信号转换为电信号，并将信号放⼤；电信号转化为数字信号；流式软件：

收集，分析，数据和图⽚的输出。

液流系统

单细胞液流的形成

我们在第⼀讲中就介绍了流式细胞术就是利⽤流式细胞仪对处在快速直线流动状态的单细胞进

⾏逐个分析的技术。那么单细胞液流是如何形成的呢？

重点：

FSC

和

SSC

参数

实验⼩⽩将实验样本制备成单细胞悬液，染⾊后就可以上机检测了。单细胞悬液在上述的液流

系统带动下逐个通过流式细胞仪的检测点，经过机器内部复杂的处理后，我们就可以得到⼀系

列的数据。

然⽽，不管您是做什么流式实验，最先得到的都是

FSC

和

SSC

数据。即使样本没有经过任何染

⾊，您也可以得到

FSC

和

SSC

数据。

1. FSC

和

SSC

参数的意义