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流式细胞术散点图参数中FSC

2023-04-09 19:56| 来源: 网络整理| 查看: 265

前向角散射,即FSC与细胞直径平分正相关(大小),所以我们平时上机的时候,有时用FSC做阈值,排除碎片及其它颗粒,避免干扰。

侧向角散射,即SSC是指与激光束正交90度方向的散射信号,它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更敏感,可以提供细胞内结构及颗粒性质的信息

FL2-A ,FL2-W 中A和W的含义

FL2-H1024,FL2-H256 中H的含义,1024和256又代表什么呢。

名词“道数”是怎么定义的?

w好像代表脉冲宽度,但是脉冲宽度反映的是细胞什么特性呢?H-脉冲高度反映细胞什么特性呢?

好像你做的是细胞周期分析,如果是,FL2-A代表的是荧光峰面积,反映了细胞DNA含量(前提是用Rnase处理去掉了RNA);FL2-W代表的是荧光峰宽度,这个值可以区分单个细胞和双联体细胞;下面的1024和256是定义数据文件大小的(记得培训时工程师这么说的)

-H好像没有什么特殊含义 ,就是指这个通道了,一般检测那个通道的荧光就是选择哪个-H,比如FSC-H,SSC-H,FL1-H等等

流式涉及的调节参数太多了,主要的有:1.电压2.阈值3.荧光补偿4.通道选择:需要哪些通道、选择面积/高度/宽度、线性/Log5.停止条件选择

太多太多了

FL2-A代表FL2 AREA,FL2-H即FL2 HEIGHT,通过这两个参数,可以将粘连体排除出去,因为粘连体跟多倍体有相同的FL2-A,但是FL2-H远远大于正常细胞。正确的设置是将FL2-A设置在200附近。当然,不设在200也可以,但是那样会对日后的分析造成困难。200道是对周期分析最佳的参数。

FSC是前向角散射,一般代表细胞的体积,值越大代表细胞越大。

SSC是侧向角散射,一般代表细胞的颗粒度,值越大代表细胞的颗粒度越大,颗粒度指细胞表面的皱折度,细胞内亚细胞器、颗粒的数目等。



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