SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理

聚促丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N'一亚甲基双丙烯酰胺(简云化求福减移立况裂我包称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP)，N，N，N'，N' 四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。

聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分曾且九率洲陈零牛直子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离纯化的样品扬各氧抗曲括独普触正劳中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只分离出一条区带。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键，并按一定的比例和蛋白质分子结合形成密度相同的短棒状复合物，不同分子量的蛋白质形成的复合物的长度不同，其长度与蛋白质分子量呈正相关，使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。因此，各种蛋白质 SDS复合物在电泳时的迁移率，不再受原有电荷和分子形状坏的影响，只是分子量的函数。这种电泳方法称为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称河SDS-PAGE)。由于SDS PAGE可设法将电泳州能跑套烧准节意孩战因时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度，因此常用来鉴定蛋白刑急美反渐食木老别质分离样品的纯化程度，如果被鉴定的蛋白质样品很纯，只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的极加蛋白质，那么 SDS-PAGE后，就只出现一条蛋白质区带。SDS-PAGE可分为圆盘状和垂直板状、连续系统和不连续系统。本实验采用垂直板状不连续系统。所谓"不连续"是指电泳体系由两种或两种以上的缓冲液、pH和凝型头费教多行胶孔径等所组成。