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简析:免疫共沉淀(Co

2023-04-13 17:22| 来源: 网络整理| 查看: 265

原标题:简析:免疫共沉淀(Co-IP)与免疫沉淀(IP)的区别

免疫共沉淀(Co-IP)

Co-IP是免疫沉淀的延伸,主要用于蛋白-蛋白相互作用检测。Co-IP的原理是基于IP反应捕获和纯化靶蛋白,如果样品溶液中存在与靶蛋白相互作用的目的蛋白,也会被一同捕获及纯化得到,随后利用SDS-PAGE,Western Blot等手段对得到的目标蛋白进行分析(查看详细Co-IP实验原理)。

图1:免疫共沉淀原理

免疫沉淀(IP)

免疫沉淀是用于抗原检测和纯化的最广泛使用的方法之一。免疫沉淀(IP)的原理为:针对特定靶蛋白的抗体与样品(细胞裂解物等)中的靶蛋白形成免疫复合物,随后利用Protein A-磁珠或Protein G-磁珠将该免疫复合物从混合物中沉淀下来。最后将靶蛋白从磁珠上洗脱(如果抗体没有共价连接到磁珠上或使用变性缓冲液进行洗脱,抗体也会被洗脱下来),并通过SDS-PAGE,Western Blot等手段对洗脱下来的蛋白进行分析。

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