TRIS缓冲液和磷酸盐缓冲液的区别

生物缓冲液常用于生物化学研究实验当中，具有极为重要的意义，是一类能够抵制外界少量强酸和强碱的影响，维持PH值基本不变的调节液。其中经常使用的生物缓冲液有Tris 缓冲溶液、PBS缓冲溶液、CAPS缓冲液、MOPS缓冲液、TAPS缓冲液以及EPPS缓冲液。本文将从几个方面对最常使用的Tris缓冲溶液和PBS缓冲溶液进行对比介绍。

1.缓冲范围

三羟甲基氨基甲烷（Tris）为弱碱，分子式为C4H11NO3，分子量为121.14，在25 °C下pKa为8.1，其缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。在生物化学实验中常用的pH值为6.8、7.4、8.0、8.8。Tris被广泛用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备，甚至有超过磷酸盐缓冲液的趋势。

磷酸盐缓冲液（PBS）是以磷酸盐为pH缓冲，氯化钠为渗透压平衡的盐溶液，通常使用的有磷酸钠缓冲液和磷酸钾缓冲液。由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲溶液。

2.配置方法

配制Tris-HCl缓冲液的方法有两种：分别配制 Tris和 HCl溶液，然后按常用表中所列体积混合即可。但是由于标准浓度的稀盐酸不易配制，所以常用另一种方法：以配置Tris-HCl缓冲液为例：先将 Tris碱溶于950 mL～970 mL 去离子水中，边搅拌边滴加 HCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水进去即可。

磷酸盐缓冲溶液的配制方法：称NaCl， KCl， KH2PO4和K2HPO4，溶于800 mL 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4 ℃冰箱中即可。需要注意的是，通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na+或K+的浓度，Na+和K+只是用来调节渗透压的。配置磷酸盐缓冲溶液时钾盐比钠盐好，钠盐在低温下不容易溶解，而钾盐的溶解度相对高一些。

3.使用领域

Tris缓冲溶液 在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值；在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值；被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和存储；将调节pH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。

磷酸盐缓冲溶液一般的有活性的生物制剂都要用磷酸盐缓冲溶液来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整适宜pH值的缓冲作用。蒸馏水不具有盐平衡作用，会破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首选。当然，PBS也不是万能的，有的生物活性物质需要的条件比较高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。因此PBS主要用于细胞实验，其缓冲范围最适宜在中性。

在生物化学实验中要慎重地选择缓冲溶液，不仅要考虑缓冲液的缓冲范围，还要综合考虑缓冲液的使用环境。湖北新德晟材料专业生产研发生物缓冲液已有多年，德晟拥有独立的研发团队，对产品的研发生产已有十分丰富的实战经验。目前德晟出品的生物缓冲液等产品，已销往全球多个国家，均收到好评复购，与众多国外客户达成长期合作。如果你有意向了解的话，可以来电咨询，德晟欢迎您的来电。返回搜狐，查看更多

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